CD6^+γδT細胞による副腎クロマフィン細胞の刺激と神経細胞への形質転換

CD6^+γδT细胞刺激肾上腺嗜铬细胞并转化为神经元

• 批准号: 11760199
• 负责人: 今野 明弘
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11760199/
• 关键词: ウシ; CD6; CD6 ligand; ALCAM; CD166; γδTリンパ球; 自律神経; 接着分子; γST細胞; 交感神経

脾臓組織cDNAを鋳型にしてPCRクローニングを行い、現在までに、翻訳領域の5'末端36塩基と3'末端21塩基を除く2つのウシCD6アイソフォーム(boCD6a 1653塩基;boCD6b 1470塩基)cDNAのシークエンスを終了した。ウシCD6結合分子については、免疫組織化学的研究によって、ヒトCD6結合細胞が高密度に分布していた交感神経節(頚胸神経節)のcDNAを鋳型にして、同様にPCRクローニングを行い、ウシALCAMの全翻訳領域(1749塩基)の配列を決定した。次に、CD6およびALCAMの両結合部位をヒト、マウス、ウシで比較し、結合に必要不可欠な配列がウシにおいても完全に保存されていることを確認した。さらに、ヒトCD6結合細胞が存在した組織(大脳軟膜、延髄、胸髄、頚胸神経節、副腎髄質、胸腺、脾臓、リンパ節)におけるウシALCAMの発現をRT-PCR法によって研究し、同組織にはALCAM mRNAが発現していることを明らかにした。以上の結果から、ウシ組織上のヒトCD6結合分子はALCAMであり、ウシのCD6とALCAMが結合可能であると考えられた。また、ウシ脾臓単核細胞分画cDNAを鋳型にしてウシNGF特異的プライマーを用いてPCRを行い、同分画中にNGF mRNAの発現を確認した。抗ウシNGFポリクローナル抗体、抗ウシγδTリンパ球抗原受容体(TcR)モノクローナル抗体(mAb)および/または抗ウシCD6 mAbを一次抗体とした組織蛍光抗体2重染色法では、脾臓のCD6^+γδTリンパ球の細胞質中にNGFの免疫活性が確認された。これらの結果から、CD6^+γδTリンパ球はALCAM^+交感神経終末に脾臓組織中で接着するとともに、NGFを分泌し、交感神経の成長・維持に関わることが示唆された。

The cDNA of spleen tissue was typed in PCR, and the cDNA sequence was completed in the 5'terminal 36-mer and 3' terminal 21-mer regions except for the CD6-mer (boCD6a 1653-mer; boCD6b 1470-mer)cDNA. CD6-binding molecules were detected by immunohistochemistry, and CD6-binding cells were distributed in high density. The cDNA of sympathetic neurons was typed by PCR. The alignment of ALCAM in the whole domain (1749 bp) was determined by PCR. The binding sites of CD6 and ALCAM were identified as being completely preserved. The expression of ALCAM mRNA in CD6-binding cells was studied by RT-PCR in different tissues (e.g., soft tissue, medulla oblongata, thoracic gland, adrenal gland, thymus, spleen, kidney). The above results show that CD6 binding molecules on the tissue can bind to ALCAM. The expression of NGF mRNA was confirmed by PCR in the same DNA sequence. Anti-NGF anti-CD6 antibody, anti-CD6 anti-CD6 anti-CD6 CD6^+γδT cells are associated with ALCAM^+ sympathetic nerve terminals, NGF secretion and sympathetic nerve growth and maintenance.

项目成果

Konno, A., Ahn, J-S., Kitamura, H., Hamilton, M.J., Gebe, J.A., Aruffo, A., Davis, W.C.: "Tissue distribution of CD6 and CD6-ligand in cattle : Expression of the CD6-ligand (ALCAM, CD166) in the autonomic nervous system of cattle and the human."Journal of

Konno, A.、Ahn, J-S.、Kitamura, H.、Hamilton, M.J.、Gebe, J.A.、Aruffo, A.、Davis, W.C.：“CD6 和 CD6-配体在牛中的组织分布：CD6-配体的表达