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ミジンコの形態形成遺伝子群の機能と分子進化

水蚤形态发生基因的功能和分子进化

基本信息

批准号：
11760226
负责人：
志賀靖弘
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Tokyo University of Pharmacy and Life Science
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2000
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11760226/
关键词：
ミジンコ Hox 分子進化 Daphnia Hox遺伝子形態形成遺伝子

项目摘要

1)ミジンコHox遺伝子群およびその標的遺伝子群の発現時期および領域の特定ミジンコ全胚に対するin situ hybridization法により、これまでにcDNAクローンを得ていたDapdpp,Dapmlp,およびDapmshの発現時期および発現領域を明らかにした。またリン酸化型Madに対する特異抗体を用いた免疫染色法により、ミジンコ胚発生過程におけるその活性化部位を特定した。2)ミジンコHox遺伝子群およびその標的遺伝子群的コードする染色体DNAの解析これまでに得ていた、DapAntp遺伝子を含む染色体DNAクローンの全塩基配列を決定し、DapAntp遺伝子のエキソン/イントロン構造を明らかにした。またこの解析を通して、ミジンコにおいては、DapAntp遺伝子とDapUbx遺伝子の一部が重複して染色体上に存在していること、DapAntpのプロモーターの内の一つはDapUbx遺伝子内に存在することを強く示唆する結果を得た。3)ミジンコの形質転換系の開発形質転換系の開発の前段階として、ミジンコの生殖系列の発生/分化を追跡する良いマーカーなり得る、ミジンコvasa cDNAをクローン化し、その全塩基配列を決定した。大腸菌で発現させた組み替えVasaタンパクを、ラットに免役し、それに対する特異抗体を作製した。この抗体を用いて、ミジンコ全胚に対する免疫染色を行い、ミジンコの生殖系列の発生/分化/移動の過程を明らかにした。

1) The development time of Hox gene subgroup and target gene subgroup and domain-specific gene expression in situ hybridization method, Dapdpp,Dapmlp, Dapmsh gene expression time and domain-specific gene expression. The specific antibody to the acidified Mad was used to identify the active sites in the embryonic development process. 2) The analysis of chromosomal DNA from the chromosome of the Hox gene subgroup and the target gene subgroup is carried out to determine the complete base alignment of the DapAntp gene containing chromosomal DNA, and the structure of the DapAntp gene is clearly defined. The results of this analysis are as follows: 1. There is a duplication of DapAntp gene and DapUbx gene on chromosome 2. There is a duplication of DapAntp gene in chromosome 3. There is a duplication of DapUbx gene in chromosome 4. There is a duplication of DapAntp gene in chromosome 5. There is a duplication of DapUbx gene in chromosome 6. There is a duplication of DapAntp gene in chromosome 7. There is a duplication of DapUbx gene in chromosome 6. 3) The early stage of development of the gene transformation system, the development/differentiation of the gene reproduction series, the identification of the gene transformation system, and the determination of the gene sequence. E. coli is found in groups of bacteria, and specific antibodies to E. coli are produced. This antibody is used to detect the development, differentiation and migration of the whole embryo.