原発性胆汁性肝硬変の動物モデルの作製-Methylene dianilineのマウスへの長期投与の検討-

原发性胆汁性肝硬化动物模型的制作-对小鼠长期给予亚甲基二苯胺的研究-

• 批准号: 11770089
• 负责人: 片柳 和義
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Kanazawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11770089/
• 关键词: 原発性胆汁性肝硬変; Methylene dianiline; PDC-E2; 動物モデル; 原発性肝汁性肝硬変

Methylene dianiline(MDA)を用いた原発性胆汁性肝硬変の動物モデルの作製I.予備実験1.投与量の決定肝内外の胆道系上皮に障害を惹起するMDAの最小有効量を決定するために,種々の濃度のMDAをマウス(BALB/c,雌,4週齢)に腹腔内投与し,検討した結果,至適投与量は20.0mg/kg(約0.4mg/mouse)であることが判明した.2.ヒトPDC-E2の合成及び精製米国カリフォルニア大学デービス校Gershwin教授より分与されたヒトPDC-E2のDNAを組み込んだ大腸菌を大量培養して,ヒトPDC-E2を発現させ,種々の操作により精製し,回収した.II.本実験予備実験で得られたMDA投与量をBAL/cマウスの(雌,4週齢)を用いて,一年間に渡る実験を遂行した.MDAは2カ月毎に腹腔内に投与し,また,ヒトPDC-E2の免疫は1カ月毎に施行した.コントロール群として,MDA不投与群,ヒトPDC-E2の代替としてウシ・アルブミンで免疫した群を設け,具体的には以下の4群に分けて実験を実施した.なお,各グループのマウスは2カ月毎に数匹ずつ犠死させ,臓器と血清を採取した.グループ1 MDA投与+ヒトPDC-E2免疫 グループ3 MDA不投与+ヒトPDC-E2免疫グループ2 MDA投与+ウシ・アルブミン免疫 グループ4 MDA不投与+ウシ・アルブミン免疫本実験を一年間に渡って遂行したが,ヒトPDC-E2を免疫したグループ群では血清学的にヒトPDC-E2に対する抗体が100%に頻度で産生されていることが示された.さらにマウスのPDC-E2に対する自己抗体も半数以上のマウスで出現することが判明した.ただし,肝臓の形態学的観察ではMDAの投与により一過性に胆管が障害されるものの,慢性胆管炎が遷延性に持続することはなかった.

Methylene dianiline(MDA) is used in the treatment of primary biliary cirrhosis in animals. I. Preparation 1. Determination of the dosage of MDA to cause damage to the biliary epithelium inside and outside the liver. Determination of the minimum effective amount of MDA.(BALB/c, female, 4 weeks old). The optimal dose was 20.0 mg/kg. 2. Synthesis and purification of PDC-E2 by Professor Gershwin of the University of Michigan. II. The present study was conducted in response to the findings of the study.MDA was administered intraperitoneally every 2 months, and PDC-E2 was administered every 1 month. In the case of MDA, PDC-E2 is replaced by MDA, and the following four groups are implemented. Every month for 2 months, the number of people killed, the number of people killed. 1 MDA administration and + PDC-E2 immunization 3 MDA non-administration and + PDC-E2 immunization 2 MDA administration and + PDC-E2 immunization 4 MDA non-administration and + PDC-E2 immunization 1 year after immunization, PDC-E2 immunization and serological PDC-E2 immunization occurred 100% of the time. More than half of the PDC-E2 antibodies were detected. In addition, the morphologic changes of liver tissue were observed, and the effects of MDA on bile duct function were observed.

项目成果

Kazuyoshi Katayanagi: "Generation of Monoclonal Antibodies to Murine Bile Duct Epithelial Cells: Indentification of Annexin V as a New Marker of Small Intrahepatic Bile Ducts"Hepatology. 29・4. 1019-1025 (1999)

Kazuyoshi Katayanagi：“小鼠胆管上皮细胞单克隆抗体的生成：膜联蛋白 V 作为小肝内胆管新标记物的鉴定”肝病学 1019-1025。