初代培養小脳プルキンエ細胞を用いたCAGリピートによる神経細胞変性の解析

使用原代培养的小脑浦肯野细胞分析 CAG 重复引起的神经元变性

• 批准号: 11770083
• 负责人: 田中 敬子
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Osaka Bioscience Institute
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11770083/
• 关键词: ポリグルタミン; 神経変性疾患; トランスジェニック; 神経突起の退縮; Rho; イオンチャネル

本研究の目的は、CAGリピート病(ポリグルタミン病)において神経細胞死に先行して起こる神経変性の分子機構を明らかにすることである。この研究に使用するため、小脳プルキンエ細胞にGFPを発現するマウスを作製してきた。L7-promoterの下流にGFPをつないだトランスジーンを持つマウスを、7-line作製することができたが、いずれも発現量が非常に低くGFP蛍光を観察できるlineを確立することはできなかった。一方、tetracyclin off systemによりポリグルタミンを発現するPC12細胞を使って、NGFで分化させた後にポリグルタミン発現誘導を行い、ポリグルタミンによる神経細胞の形態変化に関して解析を行ってきた。その結果、ポリグルタミンにより細胞死に至る前に神経突起の退縮が起こることがわかり、昨年度の報告書にて述べた。本年度はこの神経突起の退縮の機構を調るため、まず神経突起の退縮に関与することがわかっているRho kinaseの関与を調べた。その結果、Rho kinase inhibitor存在下で、このポリグルタミンによる神経突起の退縮が抑制されることがわかった。さらに、Rho kinaseとその上流であるRhoの活性化がポリグルタミンによって引き起こされることをがわかった。このことから、ポリグルタミンによって何らかの機構でRhoの活性化が起こり、それにより、神経突起の退縮が起こっていることを示すことができた。このRho-Rho kinase経路による神経細胞骨格の変化が、ポリグルタミン病で見られる神経症状のうち少なくとも初期症状の誘発に関与するものと考えられる。現在、ポリグルタミンによるRhoの活性化機構について検討している。

The aim of this study is to clarify the molecular mechanisms of CAG disease in the early stages of neuronal death. This research was carried out using ta, a small skin cell to produce GFP. L7-promoter downstream GFP detection line is very low, 7-line control is very low, GFP detection line is very low, 7-line control is very low. A tetracyclin off system is used to detect and analyze the morphological changes of PC12 cells after differentiation and differentiation of NGF. The results of the study were described in the report of the year before the death of the cell. This year, the relationship between Rho kinase and the mechanism of neurogenesis retraction was adjusted. In the presence of Rho kinase inhibitor, the inhibition of neuronal processes was observed. Rho Kinase and Rho Activity At this point, the activation of Rho can occur in any organization in the complex environment, and the retraction of nerve protrusions can occur. This Rho-Rho kinase pathway is associated with changes in neuronal bone structure and changes in the severity of neurological symptoms. Now, Rho's activation mechanism is under investigation.

项目成果

Shibuya I et al.: "Prostaglandin E_2 induced Ca^<2+> release from ryanodine/caffeine-sensitive stores in bovine medullary cells via EP1-like receptors"J.Neurochem.. 73. 2167-2174 (1999)

Shibuya I等人：“前列腺素E_2通过EP1样受体从牛髓细胞中的兰尼碱/咖啡因敏感储存中诱导Ca ^ 2 释放”J.Neurochem.. 73. 2167-2174 (1999)

Shibuya. I et al.: "Evidence that multiple P2X purinoceptors are functional expressed in rat supraoptic neurons"J.Physiol.. 514. 351-367 (1999)

涩谷。