ヒト肝癌細胞に生ずる腫瘍増殖因子によるアポトーシスの分子機構の解明

阐明肿瘤生长因子诱导人肝癌细胞凋亡的分子机制

• 批准号: 11770289
• 负责人: 新浪 千加子
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Tokyo Women's Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11770289/
• 关键词: アポトーシス; 肝癌; TGF-β; MAPK; DI3K; 肝細胞

継代肝癌細胞(HuH2,HuH7,Hep3B)に対してTGF-bを添加し、経時的及び濃度依存性にアポトーシスをFACSにおけるsubGl populationとして測定すると、TGF-bは0.1〜0.5ng/mlでアポトーシスを招来し、48時間後にピークに達した。TGF-b添加前にEGF(上皮増殖因子)やHGF(肝細胞増殖因子)を前もって加えておくとアポトーシスは抑制された。これらの分子機構を明らかにするために、MAPK抑制剤もしくはAKT抑制剤をEGF、HGF添加前に培養液中に加えておくと、再びアポトーシスが観察されるようになった。一方HepG2細胞はTGF-bでアポトーシスを来さない。そこでこの細胞培養液中にMAPK抑制剤もしくはAKT抑制剤を前添加し、その後TGF-bを加えてアポトーシスの割合を測定した。すると他の3肝癌細胞株と同様にアポトーシスが観察され、しかもMAPK抑制剤もしくはAKT抑制剤の濃度依存性にアポトーシスの割合は増加した。これらの結果は肝癌細胞はTGF-bに感受性があり、アポトーシスとして増殖抑制されることを示している。またHepG2細胞の結果から、内在性にMAPKやAKTのシグナル伝達系が活性化されている場合にも、またHuH2,HuH7,Hep3Bのように細胞外部からこれらの情報伝達経路が活性化される場合においても、TGF-bによるアポトーシスを抑制できる事が判明した。

The generation of hepatoma cells (HuH2,HuH7,Hep3B) is sensitive to the addition of FACS, temporary and intensity-dependent subGl population, TGF-b, 0.1~0.5ng/, and 48, respectively. TGF-b was added with EGF (epithelial colonization factor) and HGF (hepatocyte colony factor). The molecular mechanism is required to check the temperature, the MAPK, the AKT, the EGF, the HGF before the addition of the culture solution, and then to make sure that it is used to check the temperature. One side of the HepG2 cell, TGF-b cell, the cell and the cell. In the cell culture solution, the MAPK inhibition was added before the AKT inhibition, and the TGF-b was added after the cell culture. The cell lines of hepatocellular carcinoma (HCC) were divided into two groups: MAPK inhibition, AKT inhibition, degree dependence, cutoff and fusion. The results showed that the sensitivity of hepatoma cells to TGF-b was significantly higher than that of hepatoma cells, and the colonization inhibition was not detectable. According to the results of the HepG2 cell test, the results of the internal MAPK response AKT response response is related to the activation response, the HuH2,HuH7,Hep3B response response, the extracellular activation response, the activation response, the response response, the inhibition response, the inhibition response, the activation response, the activation response, the inhibition response, the activation response, the activation response, the inhibition response, the activation response, the activation response, the inhibition response, the activation response, the inhibition response, the activation response, the inhibition response, the activation response, the inhibition response, the activation response, the activation response, the inhibition response, the activation response, the inhibition response, the activation response, the inhibition response, the inhibition response, the activation response, the inhibition