結合織性毛包細胞におけるnexin-1の発現と男性ホルモンの影響

结缔组织毛囊细胞nexin-1的表达及雄激素的影响

• 批准号: 11770469
• 负责人: 園田 忠重
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: 大分医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11770469/
• 关键词: 毛包; protease nexin-1; 男性型脱毛; 男性ホルモン; 結合織性毛包; 毛乳頭; 蛋白発現; in situ hybridization

1、ヒト毛包におけるprotease nexin-1(PN1)の局在PN1に対するRNA probeおよび抗体を作製するため、以下の方法でsignal peptideを除いた全長PN1 cDNAの発現ベクターの構築、蛋白発現およびその精製を終えた。(培養ヒト毛乳頭細胞からtotal RNAを抽出→RT-PCR法にて上記のPN1 cDNAを増幅→PCR産物をpGEM-T Easy Vectorにクローニング→pGEX-4T-3 Vectorにサブクローニング→塩基配列、フレーム、方向性に異常ないことをシークエンスにて確認→GST-PN1蛋白の発現誘導→Batch法にて蛋白を精製→抗GST抗体を用いたWestern blottingで確認→thrombinを用いてPN1をGSTから分離→アミノ酸シークエンスで確認)現在In vitro transcription法によるdigoxigenin標識RNA probeおよびPN1発現蛋白に対するモノクローナルおよびポリクローナル抗体を作製中である。2、結合織性毛包細胞で発現されるPN1 mRNAに対する男性ホルモンの影響10^<-8>Mのdihydrotestosterone存在下で培養した結合織性毛包細胞からtotal RNAを抽出し、RT-PCRおよびslot blot hybridization法を用いて半定量的にPN1 mRNAの発現量をcontrolと比較した。しかし両者に有意な差は認められなかった。

1. The general protease nexin-1 (PN1) office uses the PN1 to detect the RNA probe antibody. The following method uses signal peptide to remove the full-length PN1 cDNA, which shows that the protein is sensitive and sensitive. (culture milk

项目成果

Sonoda T: "The mRNA for protease nexin-1 iS expressed in human dermal papilla cells and its level is affected by androgen"Journal of Investigative Dermatology. 113・3. 308-313 (1999)

Sonoda T：“人真皮乳头细胞中表达的蛋白酶 nexin-1 的 mRNA 及其水平受雄激素影响”《皮肤病学研究杂志》113・3 (1999)。