RI標識アンチセンス核酸による心臓疾患の異常蛋白mRNA発現の画像化に関する研究

RI标记反义核酸对心脏病异常蛋白mRNA表达的成像研究

基本信息

  • 批准号:
    11770526
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.34万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
  • 财政年份:
    1999
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1999 至 2000
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

1.目的 ラット大動脈縮窄モデルを作成し、β-MHC mRNAに対するRI標識オリゴヌクレオオチドアンチセンスによる心筋内β-MHC mRNA発現の画像化が可能かどうかを検討した。2.方法 (1)23塩基のβ-MHC mRNAに対するセンス鎖、アンチセンス鎖オリゴヌクレオチド(ODN)のT位をアミノ化したgag Tag aTc ttg Tgc Tac cca ac、 gt Tgg gTa gca caa gaT cTa ctcを作成。更にIBEと合成し、^<111>Inと標識して、^<111>In-IBE-ODNを得、標識率も算出した。 (2)6週のWister ratを腹部大動脈をナイロン糸により縮窄したAoB群と腹部大動脈を剥離する操作までを同様に行ったcont群に対して作成3-4週間飼育後、^<111>In-IBE-ODN(sens、antisense)を尾静脈より投与し、2時間後にsacrificeして、心臓を含む各臓器の集積率を測定した。3.結果 (1)^<111>In-IBE-ODNの標識率はセンス鎖、アンチセンス鎖でそれぞれ90%、91%と良好な標識率を得た。 (2)AoB群(sens静注群:n=6、anti静注群:n=6),cont群(sens静注群:n=6、anti静注群:n=6)について心集積率、心バックグランド比をそれぞれの群間で比較したが有意差が認められなかった。4.考察 :大動脈縮窄により心肥大が起こり、同時に本来胎児型遺伝子であるβ-MHC mRNAが心筋に発現してくる。この発現を^<111>Inで標識したβ-MHC mRNAに対するアンチセンスで画像化可能かを検討したが、センス鎖の標識体でも心筋に同様の集積を認め、且つ対象群とも有意差を認められなかったことからアンチセンスメカニズムによる心筋への特異的集積は確認できず、画像化は困難と考えられた。今後は投与法の改善や、標識方法の改善などが求められる。
1. Objective: To investigate the possibility of mapping β-MHC mRNA expression in cardiac muscle by using RI markers related to β-MHC mRNA. 2. Method (1)23-base β-MHC mRNA translation was established by the following steps: 1. The T position of ODN was changed into Tag aTc ttg Tgc Tac cca ac, gt Tgg gTa caa gaT cTa ctc. In addition, IBE synthesis, identification<111><111>, identification and ratio calculation (2)6 After 3-4 weeks of incubation<111>, the accumulation rate of each organ was measured after 2 hours of sacrifice and heart failure. 3. Results (1) The <111>identification rate of ^ In-IBE-ODN was 90%, 91% and good. (2)AoB group (sens group:n=6, anti group:n=6),cont group (sens group: n=6, anti group:n=6). 4. Investigation: Arterial constriction, cardiac hypertrophy, and at the same time, the expression of β-MHC mRNA in cardiac muscle. The <111>expression of this gene is mainly due to the identification of β-MHC mRNA, the identification of the same gene, and the identification of the specific gene. In the future, the improvement of the law and the method of identification shall be sought.

项目成果

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