内分泌攪乱物質の2型糖尿病発症に及ぼす影響(核内受容体ファミリーレセプターの活性化による遺伝子転写能の研究)

内分泌干​​扰物对2型糖尿病发病的影响（通过激活核受体家族受体研究基因转录能力）

• 批准号: 11770652
• 负责人: 根本 昌実
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Jikei University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11770652/
• 关键词: PPARγ遺伝子; NIH3T3-L1細胞; 内分泌攪乱物質; dioxin; TCDD

【目的】2型糖尿病発症に関与する遺伝子は明らかにされつつあるが、これと対応する環境因子は明らかではない.核内ホルモン受容体を作用点とする内分泌攪乱物質dioxinがPPARγを標的として糖脂質代謝に影響を及ぼしているか否かを知るため、マウス前脂肪細胞にdioxinを作用させて分化とPPARγ遺伝子発現、及び変異型Pro12Alaの反応性の相違につき検討した.【方法】1)DEX、IBMX、INSにより3T3-L1の分化を誘導、dioxin(2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin)50nMを培地に添加、対照群としてDMSO 50nMを添加した.2、7、14日目にOil Red O染色した.2)14日目にPPARγ mRNA発現をノーザン解析を行った.3)PPARγ2遺伝子のcodon 12がProである野生型とAlaである変異型をpCMVベクターに組み込み、L1細胞で強制発現させた.更に分化の誘導とdioxin暴露を行い、14日目にPPARγのmRNA発現をノーザン解析を行った.【結果】1)Oil Red Oによる染色性は2、7日目では差を認めなかったが、14日目ではdioxin群は対照群と比較して染色性が低く、中性脂肪合成の阻害効果を示した.2)PPARγ mRNA発現量はdioxin群において対照群に比較して30%抑制し、PPARγの転写抑制を介した脂肪合成の抑制であることを示唆した.3)PPARγ2遺伝子のalleleタイプによっても反応性に差を認めなかった.【考察】dioxinはPPARγ遺伝子発現の抑制を介してL1における脂肪合成を抑制し、脂肪細胞への分化も抑制した.脂肪細胞における主なインスリン作用である脂肪合成を低下させ、インスリン感受性の高まる分化を抑制したことから、dioxinはインスリン抵抗性を来す環境因子であると推定された.

[Objective] Type 2 diabetes mellitus (DM) is a disease associated with environmental factors. Dioxin, an endocrine disruptor, targets PPARγ in nuclear receptors, affects glucose and lipid metabolism, and its role in adipocyte differentiation, PPARγ gene development, and heterotypic Pro12Ala. [Method] 1)DEX, IBMX, INS 3T3-L1 differentiation induction, dioxin (2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin)50nM added in culture and DMSO 50nM added in Oil Red O staining on day 2, 7 and 14; 2) PPARγ mRNA expression on day 14 analyzed by PCR; 3)PPARγ2 gene codons on day 12 Pro wild-type; Ala; and pCMV isoforms. L1 cells were exposed to stress. The expression of PPARγ mRNA was analyzed on the 14th day after induction and dioxin exposure. [Results] 1)Oil Red O staining was lower than that of dioxin group on day 2 and 7, and inhibition effect of neutral fat synthesis was lower than that of dioxin group on day 14. 2)PPARγ mRNA expression was 30% inhibited compared with that of dioxin group. PPARγ gene synthesis inhibition is a key factor in lipid synthesis. Dioxin inhibits the development of PPARγ gene, inhibits lipogenesis in L1, and inhibits adipocyte differentiation. Adipose cells are affected by low levels of lipogenesis, high levels of lipogenesis, and high levels of lipogenesis resistance.