局所脳虚血モデルにおける脳低温のアポトーシス関連遺伝子発現に及ぼす影響について

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低体温は、様々な機序で虚血に対して神経細胞を保護する。虚血後、神経細胞のあるものはアポトーシス様の死を遂げることが知られているが、最近では、虚血中の低体温がアポトーシス様細胞死(以後アポトーシス)を減弱させる作用を持つことが報告された。我々は虚血後より開始した低体温が同様にアポトーシスにたいして影響を及ぼすかに関して、以下の実験を行った。実験方法;30匹の成熟雄性Wistarラットを用いた。塞栓糸法により、1時間の一過性中大脳動脈閉塞モデルを作成。1時間後より再灌流を開始、動物を無作為に常温群と低体温群に分けた。低体温は冷却ボックスに動物を置き、脳温を摂氏34.0±1.0度、16時間維持した後徐々に復温した。再灌流より1、2,3,5,7日後に脳を摘出、皮質領域の凍結薄切片を作成した。各時間毎の切片にTUNEL(In situ DNA nick-end labeling)を行い、光顕下にTUNEL陽性細胞数を数え常温群と低体温群間で比較した。また、同部位の切片においてアポトーシスを促進的に働くBax蛋白に対する免疫染色を行い、二群間で比較した。結果;低体温群は常温群に比して有意にTUNEL陽性細胞数を減少させた。常温群では陽性細胞数のピークは2日後、低体温群では3日後であった。また、低体温群は常温群に比してBaxの免疫染色性は低下していた。考察;低体温が虚血後に生じるアポトーシスを減弱させる機序は、現在明らかではないが、今回の結果より、低体温はアポトーシス関連蛋白の発現を修飾すること(アポトーシス促進蛋白の発現抑制)によってアポトーシスを減弱させ、その結果神経保護に寄与している可能性があることを示された。本研究の一部は第59回日本脳神経外科学会総会(平成11年10月)において発表された。現在英文誌への投稿準備中である。