局所脳虚血モデルにおける脳低温のアポトーシス関連遺伝子発現に及ぼす影響について

脑低温对局灶性脑缺血模型凋亡相关基因表达的影响

• 批准号: 11770771
• 负责人: 稲桝 丈司
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11770771/
• 关键词: 好中球; マイクログリア; アポトーシス; 局所脳虚血; 脳低温; 免疫染色

低体温は、様々な機序で虚血に対して神経細胞を保護する。虚血後、神経細胞のあるものはアポトーシス様の死を遂げることが知られているが、最近では、虚血中の低体温がアポトーシス様細胞死(以後アポトーシス)を減弱させる作用を持つことが報告された。我々は虚血後より開始した低体温が同様にアポトーシスにたいして影響を及ぼすかに関して、以下の実験を行った。実験方法;30匹の成熟雄性Wistarラットを用いた。塞栓糸法により、1時間の一過性中大脳動脈閉塞モデルを作成。1時間後より再灌流を開始、動物を無作為に常温群と低体温群に分けた。低体温は冷却ボックスに動物を置き、脳温を摂氏34.0±1.0度、16時間維持した後徐々に復温した。再灌流より1、2,3,5,7日後に脳を摘出、皮質領域の凍結薄切片を作成した。各時間毎の切片にTUNEL(In situ DNA nick-end labeling)を行い、光顕下にTUNEL陽性細胞数を数え常温群と低体温群間で比較した。また、同部位の切片においてアポトーシスを促進的に働くBax蛋白に対する免疫染色を行い、二群間で比較した。結果;低体温群は常温群に比して有意にTUNEL陽性細胞数を減少させた。常温群では陽性細胞数のピークは2日後、低体温群では3日後であった。また、低体温群は常温群に比してBaxの免疫染色性は低下していた。考察;低体温が虚血後に生じるアポトーシスを減弱させる機序は、現在明らかではないが、今回の結果より、低体温はアポトーシス関連蛋白の発現を修飾すること(アポトーシス促進蛋白の発現抑制)によってアポトーシスを減弱させ、その結果神経保護に寄与している可能性があることを示された。本研究の一部は第59回日本脳神経外科学会総会(平成11年10月)において発表された。現在英文誌への投稿準備中である。

Hypothermia <s:1>, 々な sequence で and deficient blood に protect <s:1> て nerve cells を and する. Virtual, god 経 after blood cells の あ る も の は ア ポ ト ー シ ス others の die を hence げ る こ と が know ら れ て い る が, recently で は, virtual blood の hypothermia が ア ポ ト ー シ ス others in cell death (after ア ポ ト ー シ ス) weakened を さ せ る role を hold つ こ と が report さ れ た. After I 々 は virtual blood よ り began し た hypothermia が with others に ア ポ ト ー シ ス に た い し て influence を and ぼ す か に masato し て, the following の be 験 を line っ た. Experimental method; 30 <s:1> mature male Wistarラットを with ラットを た た. The occlusion of large 脳 arteries was made by the method of によ によ, 1 time <s:1> transient large 脳 artery occlusion モデ を を. After a certain period of time, よ を reperfusion を began, the animals を did nothing に the normoid group と the hypothermia group に けた. Hypothermic <s:1> cooling ボッ スに スに the animal を was maintained at ボッ and 脳 temperatures of を摂 at 34.0±1.0 ° C for 16 times, followed by slow 々に rewarming for た. Reperfusion よ よ 1, 2,3,5,7 days later に脳を extract, and <s:1> freeze thin sections of the cortical area を to make た た. Each time their の slice に TUNEL In situ DNA Nick end labeling) を い, under the light 顕 に TUNEL positive cells number を え で comparison between normal temperature group と hypothermia group し た. ま た, with parts の slice に お い て ア ポ ト ー シ ス を promote に 働 く Bax protein に す seaborne る immune dyeing line を い, comparison between two group で し た. Result; The number of に tunel-positive cells in the hypothermia group and the normoid group に was を less than that in the て て group. The number of positive cells in the normotheric group で で 2 days later and in the hypothermia group で <e:1> 3 days later であった. The <s:1> immunostaining ability of the また hypothermia group and the <s:1> normothermia group に is <s:1> lower than that of the <s:1> てBax and <s:1> て た た た. "Inspection; Hypothermia が virtual blood after born に じ る ア ポ ト ー シ ス を abate さ せ る machine sequence は, now Ming ら か で は な い が, today back to の results よ り, low temperature は ア ポ ト ー シ ス masato even protein の 発 を now modify す る こ と (ア ポ ト ー シ ス promote protein の 発 now inhibition) に よ っ て ア ポ ト ー シ ス を abate さ せ, そ の results 経 god protect に send し て い る possible The sex がある とを とを shows された. This study was published at the 59th 総 meeting of the Japanese 脳 neurosurgical society 総 (October 11, Heisei)にお て て された. The English journal へ へ is in preparation for submission である.

项目成果

Inamasu J,Suga S,et al.: "Postischemic hypothermia delayed neutrophil accumulation and microglial activation following transient focal ischemia"Journal of Neuroimmunology. (In press). (2000)

Inamasu J，Suga S，et al.：“缺血后低温延迟短暂局灶性缺血后中性粒细胞积累和小胶质细胞激活”神经免疫学杂志。