遺伝子導入シュワン細胞を用いた人工移植片開発による視神経再生

使用转基因雪旺细胞开发人工移植物进行视神经再生

• 批准号: 11771036
• 负责人: 出澤 真理
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Yokohama City University (2000)Chiba University (1999)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11771036/
• 关键词: テロメラーゼ; 上丘; 視覚回路網; 移植; 神経再生; 視神経; 神経成長因子; 細胞外基質

Schwannには視神経の再生誘導能がある.そこで培養Schwann細胞を主成分とした人工移植片に含まれる成分を操作し網膜神経節細胞の再生率を計側し、視神経再生の最適条件を検討した。さらに、その結果をもとにし、視神経-上丘間の架橋手術を行い中枢投射である上丘への再生を検討した。生後1日の新生仔ラット(Wistar種)脊髄後根神経節よりSchwann細胞を単離・培養し、telomeraseをretrovirusに組み込んで導入した.更に細胞外基質成分とNGF,BDNF,NT-4,CNTF(50ng/ml)等の神経成長因子を組合せ、長さ約1.5cmの半透膜チューブに充填し、それを左眼球側視神経切断端と右上丘との間に架橋移植した。網膜神経節細胞の再生率は移植片の遠位端へdiI色素を投与し逆行性標識された網膜神経節細胞数を計算して行った。その結果、培養Schwann細胞、細胞外基質成分に神経成長因子を加える事により、神経成長因子を加えない場合の2倍の再生率を得ることができた。さらに、移植片内だけでなく硝子体中にBDNFやCNTFを注入した系において、より高い再生率(30.28±16.97%,54.32±8.005%)を得ることが可能であった。更に、培養Schwann細胞、細胞外基質成分、NGF,FGFを混合し移植直後に、BDNF,CNTF,insulin,forskolinを硝子体注入した。術後3ヶ月目に網膜神経節細胞を逆行性標識し再生率を求めたところ、上丘への再生率は約15%であった。以上の結果より(1)人工移植片内に培養Schwann細胞、細胞外基質成分、NGFを含み、さらに硝子体へCNTFを注入することにより、最も高い網膜神経節細胞の再生率を得ることが可能であり、(2)人工移植片のような人為的な環境であっても上位中枢である上丘まで視神経の再生を誘導する事が可能であることが判った。

Schwann に は see god 経 の regeneration can induce が あ る. そ こ で culture Schwann cell を principal component と し た artificial implant に containing ま れ る composition を operation god 経 し retinal ganglion cells の を regeneration rate meter side し, depending on the optimal conditions for god 経 regeneration の を beg し 検 た. さ ら に, そ の results を も と に し 経, god - between the superior colliculus の bridge operation line を い central projection で あ る superior colliculus へ の regeneration を beg し 検 た. On the first day after birth, the ラット(Wistar strain) of the newborn, the posterior root Shinto segment of the spinal cord, よ <s:1> Schwann cells を単, were inoculated and cultured, and the telomeraseをretrovirusに group み込んで was introduced into the <s:1>. に more extracellular matrix components と model NGF, BDNF, NT - 4, CNTF (50 ng/ml) の 経 growth factor を combination せ, god is about 1.5 cm long さ の semi-permeable membrane チ ュ ー ブ に し filling, そ れ を left eye ball side god 経 cut end と upper dome と の に between bridging transplantation し た. The <s:1> regeneration rate of retinal ganglion cells <s:1>, the distal end of the transplanted film <e:1> へdiI pigment を is added to the retrograde marker された the number of retinal ganglion cells を is calculated by <s:1> て rows った. そ の results, develop Schwann cells, extracellular matrix component に god 経 growth factor を plus え る matter に よ り, god 経 growth factor を え な い occasions の 2 times の を regeneration rate have る こ と が で き た. さ ら に, stents だ け で な く nitrate daughter に BDNF や CNTF を injection し た department に お い て, よ り high い regeneration rate (54.32 + 30.28 + / - 16.97%, 8.005%) を have る こ と が may で あ っ た. More に, culture Schwann cells, extracellular matrix components, model NGF, FGF を mixed straight after に し transplantation, BDNF, CNTF, insulin and forskolin を daughter into nitrate し た. At 3ヶ months after the operation, the を regeneration rate of the を retrograde marker of the retinal Shinto cells in the に of the に retina and the へ of the superior colliculus was calculated to be approximately 15%であった. の above results よ り (1) within the artificial implant に culture Schwann cells, extracellular matrix components, model NGF を み, さ ら に nitrate daughter へ CNTF を injection す る こ と に よ り, the most high god 経 い retinal ganglion cells の も を regeneration rate to る こ と が may で あ り, (2) artificial implant の よ う な man-made な environment で あ っ て も upper center Youdaoplaceholder0 Upper hill まで vision of the Shinto sutras である regeneration を induced する events が may である である とが judge った.

项目成果

M.Dezawa et al,: "Gene transfer into retinal ganglion cells by in vivo electroporation : a new approach."Micron. (in press).

M.Dezawa 等人：“通过体内电穿孔将基因转移到视网膜神经节细胞：一种新方法。”Micron。

M. Mori, S. Kuwabara, M. Miyake, M. Dezawa, et al.: "Haemophilus influenzae has a GM1 ganglioside-like structure and elicits Guillain-Barre syndrome"Neurology. 52. 1282-1284 (1999)

M. Mori、S. Kuwabara、M. Miyake、M. Dezawa 等人：“流感嗜血杆菌具有 GM1 神经节苷脂样结构，可引发格林-巴利综合征”神经学。

M.Dezawa et al,: "Effects of light and darkness on cell deaths in damaged retinal ganglion cells of the carp retina."Acta Neurobiol.Exp.. (in press).

M.Dezawa 等人：“光照和黑暗对鲤鱼视网膜受损视网膜神经节细胞细胞死亡的影响。”Acta Neurobiol.Exp..（出版中）。

M.Dezawa et al,: "Glial cells in degenerating and regenerating optic nerve of the adult rat."Brain Res.Bull.,. 48. 573-579 (1999)

M.Dezawa 等人：“成年大鼠视神经退化和再生中的神经胶质细胞。”Brain Res.Bull.,。

M. Dezawa et al.: "Increase in nucleoli followingr X-radiation of fibroblasts of patients of Gorlin syndrome patients"J. Lab. Clin. Med. 134. 585-591 (1999)

M. Dezawa 等人：“Gorlin 综合征患者成纤维细胞 X 射线照射后核仁增加”J.