腫瘍壊死因子αノックアウトマウスにおける血管新生の発現について

关于肿瘤坏死因子α敲除小鼠血管生成的表达

• 批准号: 11771077
• 负责人: 長谷部 康子
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Showa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11771077/
• 关键词: 眼内血管新生; 腫瘍壊死因子-alpha(TNF-α); ノックアウトマウス; in vivoモデル

種々の血管新生のin vivoモデルが報告されているが、遺伝子操作動物としてマウスが広く用いられており、マウスを用いた血管新生モデルは有用であろう。そこで、高酸素負荷による眼内血管新生モデルが腫瘍壊死因子-alpha(TNF-α)ノックアウト(KO)マウス^<1)>に応用可能か試みた。Smithら^<2)>のプロトコールに準じて酸素負荷を行った。コントロールとして同じく酸素負荷をかけた野生型(C57BL/6J)マウスを用いた。血管新生の評価方法もSmithら^<2)>の方法で行った。摘出眼球を4%パラホルムアルデヒドにて固定し、パラフィン包埋した。全眼球の連続切片(5μm厚)をヘマトキシリン・エオシン染色し、内境界膜より硝子体腔側の血管内皮または周細胞の核数をカウントした。測定範囲は眼球の中心から視神経を含まない前後200μmとした。血管新生を10枚以上の切片における平均核数で評価した。実験結果は、KOマウスとコントロール両群ともに酸素負荷による死亡は認めなかった。屠殺時の体重は、コントロール群7.1±0.39(g)に対しKOマウス群7.6±0.46(g)であり、同様に発育したと考えられた。血管新生は、コントロール群で平均核数13±5(n=2)に対しKOマウス群では57±16(n=2)であり、増加を認めた。TNF-αの血管新生における作用は、大量では抑制し少量では促進すると報告されている^<3)>。今回のKOマウス群では大量のTNF-αが不足したために血管新生が増強した可能性がある。今後は個体数を増すとともに、網膜展開標本を用いて血管走行についても検討したい。また、ラット眼内血管新生モデル^<4)>のような簡便なスコアリングも作成したいと考える。1)Taniguchi,et.al:Lab Invest 77:647-658(1997)2)Smith,et.al:Invest Ophthalmol Vis Sci 35:101-111(1994)3)Fajardo,et.ai:Am J Pathol 140:539-544(1992)4)Reynaud,et.al:Invest Ophthalmol Vis Sci 35:3169-3177(1994)

Angiogenesis in vivo is reported to be useful in animals. In addition, high acid load can cause intraocular angiogenesis, which may be caused by tumor necrosis factor-alpha (TNF-α). Smith ^<2)> The wild type (C57BL/6J) has been identified as the most common type of protein. Smith's Methods for Evaluating Angiogenesis 4% of the eyeballs were extracted and embedded in the tissue. The whole eyeball was sectioned (5μm thick), and the number of nuclei in the endothelial cells of the inner boundary membrane and the body cavity was increased. Measurement of the diameter of the eyeball center before and after 200μm The average number of angiogenic sections with more than 10 pieces was evaluated. The result is that the acid load is too high to be detected. Weight at slaughter: 7.1±0.39(g); weight at slaughter: 7.6±0.46(g); weight at slaughter: 7.6±0.46(g); weight at The average number of nuclei in the angiogenesis group was 13±5(n=2), and the number of nuclei in the angiogenesis group was 57±16(n=2). TNF-α has been reported to inhibit angiogenesis to a large extent and to promote angiogenesis to a small extent. The number of TNF-α in the KO population is increasing. In the future, the number of individuals will increase, and the retina will expand. A simple and convenient method for making intraocular angiogenesis 1)Taniguchi,et.al:Lab Invest 77:647-658(1997)2)Smith,et.al:Invest Ophthalmol Vis Sci 35:101-111(1994)3)Fajardo,et.ai:Am J Pathol 140:539-544(1992)4)Reynaud,et.al:Invest Ophthalmol Vis Sci 35:3169-3177(1994)