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アデノウイルスベクターによる神経芽腫に対するN-myc遺伝子の導入と抑制

腺病毒载体将N-myc基因导入神经母细胞瘤并对其进行抑制

基本信息

批准号：
11771089
负责人：
松永正訓
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Chiba University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2000
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11771089/
关键词：
神経芽腫 N-myc NGF trk A アデノウイルス

项目摘要

N-myc蛋白は、胎生期の神経芽細胞に強く発現し、その細胞分裂を促進し分化を抑制していると理解されている。神経芽腫におけるN-mycの機能の解明は、高悪性度の神経芽腫の本態を明らかにすることになり、治療戦略の根本的な再構築に結びつくことになる。本研究では、N-myc発現アデノウイルスを神経芽腫培養細胞に感染させ、N-mycが神経芽腫の増殖、分化、細胞死に働く機構を解析する。本年度は、昨年度に作成した組み換えN-myc発現アデノウイルスAXCACHN-mycを用い、神経芽腫の分化に深く関わるNGF(神経成長因子)のシグナルとN-mycとの関与を検討した。NGFの受容体であるtrk Aの発現に対するN-myc発現の影響について、β2-Microgrobulineをインターナルマーカーとした定量的RT-PCRにて検討した。神経芽腫細胞株RT-BM-1をレチノイン酸で処理することによりtrk Aの発現が速やかに上昇するが、N-mycを導入したRT-BM-1においては、レチノイン酸によりtrk Aの発現は上昇するが、その発現量はコントロールに比べて低い事が明らかになった。このことから、N-mycはtrk Aの発現を抑制している可能性が示唆された。さらに、N-mycが神経芽腫の分化に及ぼす影響を知るため、レチノイン酸を用いてRT-BM-1を分化させる系で実験を行った。この分化誘導の際、N-mycの発現が著明に抑制されるがことが知られている。そこで、AxCACHN-mycを用いてN-mycを導入し、N-myc発現が抑制されない状態を作り、レチノイン酸による分化が抑制されるか否かを検討した。しかし、この結果、N-mycを導入した細胞でもレチノイン酸によりに分化が誘導され、レチノイン酸の系では、分化におけるN-mycの役割がNGFシグナルとは異なっていることが示唆された。

The expression of N-myc protein, fetal sprouts, mitosis, differentiation, inhibition and understanding of fetal malondialdehyde. The N-myc machine is capable of understanding and improving the nature of the disease. In this way, it is necessary to treat the disease and cure the disease. In this study, N-myc showed that there were significant differences in cell culture, cell culture, spore infection, cell proliferation, differentiation and cell death in N-myc. In this year and last year, we made a N-myc to show that there are significant differences in the use of AXCACHN-myc and the differentiation of NGF (divine growth factor). In this year and last year, the organization has been formed in this year and last year. NGF