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伸展刺激による頭頂骨矢状縫合部における骨形成促進機構の分子生物学的・形態学的解析

拉伸刺激促进顶骨矢状缝骨形成机制的分子生物学和形态学分析

基本信息

批准号：
11771135
负责人：
池亀美華
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Niigata University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2000
项目状态：
已结题

项目摘要

[1]マウス頭頂骨矢状縫合部伸展モデルにおける骨芽細胞の分化促進過程の解析昨年度までの研究の結果、マウス頭頂骨の矢状縫合部にバネ装置により伸展刺激を加えた組織培養系において、経時的に骨芽細胞の分化が促進され、その初期過程に線維芽細胞様細胞および前骨芽細胞におけるBMP-4遺伝子の発現促進が関与する可能性が示された。今回はさらに伸展刺激が骨芽細胞の増殖ならびに分化過程に及ぼす影響について明らかにするため、増殖の指標としてPCNAの免疫局在を、分化過程の指標として骨基質蛋白発現を、組織化学的に検討した。その結果、PCNA陽性細胞は、張力刺激を加えた群で、主として縫合部の骨形成端において増加すること、また、骨基質蛋白の一種である骨シアロ蛋白、オステオポンチン、オステオカルシンの遺伝子発現は張力刺激を加えた群でも、刺激を加えない群でもほぼ同様な発現過程を示すことがわかった。[2]伸展刺激により発現変化する新規遺伝子の検索薬理学講座全体のプロジェクトのひとつとして、同様の実験系において、非刺激群と伸展刺激群の縫合部より抽出したRNAをRAP法によって比較する実験の一部を担当し、その結果、伸展刺激によって3時間で発現変化する遺伝子がいくつか検出された。それらの遺伝子についてプライマーを作成し、RT-PCR法によって経時的発現変化を検討し、さらにプローブを作成し、in situ hybridization法によって遺伝子発現局在を検討中である。

[1] the process of promoting differentiation of bone germ cells in the sagittal junction of the bone was analyzed. The results of last year's study, the results of the sagittal junction of the bone, the device of the sagittal junction of the bone, the tissue culture system and the tissue culture system were used to promote the differentiation of bone germ cells. In the early stage of the disease, the possibility of promoting the growth and development of bone germ cells is demonstrated by the possibility that bone germ cells can be used in the early stage of the disease. This time, the stretching of bone germ cells stimulates the process of differentiation of bone germ cells, the process of differentiation, the process of differentiation, the process of PCNA, the process of differentiation, the process of differentiation and the process of differentiation. The results of the experiment, PCNA sexual cell culture, force stimulation in the population, bone formation in the joint of the main body, bone formation in the joint of the main body, and bone basic protein, which is a kind of human bone protein, has been shown to increase the strength of the population. To stimulate and increase the number of participants, we will be able to realize the process to show that we are going to have a good time. [2] the new rules for the realization of stretching stimuli, the new rules and regulations of the whole system, the same group, the non-stimuli group, the non-stimuli group, the RNA group, the RAP method, the control group, the control group, the non-stimulation group, the non-stimulation group and the non-stimulation group. Stretching stimuli for 3 hours to realize that the children of the baby will not be able to get out of the box. In this way, you can use the RT-PCR method to realize the system, and the in situ hybridization method to improve the performance of the system.