唾液腺における末梢型ベンゾジアゼピン受容体の薬理学的・分子生物学的特徴の検索

寻找唾液腺外周苯二氮卓受体的药理学和分子生物学特征

• 批准号: 11771147
• 负责人: 山岸 久子
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Tokyo Dental College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11771147/
• 关键词: 唾液腺; 末梢型ベンゾジアゼピン受容体; RT-PCR; in situ RT-PCR; GFPベクター; [^3H]PK14105; photoaffinity labeling; 18 kDa protein

唾液腺における末梢型ベンゾジアゼピン受容体の薬理学的、分子生物学的特徴について以下の知見が得られた。1.RT-PCRによる末梢型ベンゾジアゼピン受容体mRNAの検出:ラットの耳下腺、顎下腺、舌下腺からtotal RNAを調製した。さらにこれからmRNAを調製した。ラットの末梢型ベンゾジアゼピン受容体の塩基配列から、特異的なプライマーをデザインした。この末梢型ベンゾジアゼピン受容体の特異的プライマーを用いてcDNAを増幅し、RT-PCRを行い、電気泳動した結果、ラットの耳下腺、顎下腺および舌下腺に特異的なバンドが検出された。2.1で使用したプライマーを用いて、スライドグラス上の組織(耳下腺、顎下腺、舌下腺)に対して、in situ RT-PCRを行った結果、腺房細胞および導管部に特異的な染色が認められ、末梢型ベンゾジアゼピン受容体のmRNAが検出された。3.Green fluorescent protein(GFP)ベクターと末梢型ベンゾジアゼピン受容体cDNAを組み合わせて、融合タンパク産生ベクターを作製した。作製したベクターを唾液腺培養細胞にトランスフェクションした。現在、細胞内における末梢型ベンゾジアゼピン受容体の局在の検索を蛍光顕微鏡を用いて行っている。以上の結果から、末梢型ベンゾジアゼピン受容体mRNAは、ラットの耳下腺、顎下腺および舌下腺の腺房細胞および導管部に存在することが明らかになった。

The following observations were made on the biological and molecular characteristics of salivary gland receptors: 1.RT-PCR was used to detect total RNA in the auricular gland, submandibular gland and sublingual gland. This is the first time that I've ever been involved in this. The terminal type of the receptor is arranged in a specific manner. This terminal type of receptor specific protein was detected by cDNA amplification, RT-PCR, electrophoresis, auricular gland, submandibular gland and sublingual gland specific protein. 2.1. The results of RT-PCR in situ were analyzed by using the method of PCR. The specific staining of glandular cells and ducts was used to identify the mRNA expression in the receptor of terminal type. 3. Green fluorescent protein(GFP) is a protein that can be produced by combining the cDNA of the receptor with the cDNA of the terminal type. To prepare salivary gland culture cells Now, the end-of-cell model of the cell can be detected by optical microscopy, and the end-of-cell model can be detected by optical microscopy. The results showed that there was no expression of mRNA in the auricular gland, submandibular gland, sublingual gland and duct.

项目成果

Yamagishi H: "Pharmacological Characterization of an 18KDa Protein Associated with the Peripheral-Type Benzodiazepine Receptors in Salivary Glands"The Japanese Journal of Pharmacology. 82(2). 110-115 (2000)

Yamagishi H：“与唾液腺外周型苯二氮卓受体相关的 18KDa 蛋白质的药理学特征”《日本药理学杂志》。