動物細胞の力学刺激受容・応答の制御機構と実験的肺高血圧症誘導期における役割

动物细胞机械刺激接收和反应的控制机制及其在实验性肺动脉高压诱导阶段的作用

• 批准号: 11771443
• 负责人: 田辺 由幸
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: University of Shizuoka
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11771443/
• 关键词: ストレッチ; 血管内皮細胞; 血管平滑筋細胞; 肺高血圧症; トロンボキサンA_2; プロスタグランジンH_2; インテグリン; RGDペプチド; 肺動脈平滑筋細胞; β型PDGF受容体; チロシンキナーゼ; メカノトランスダクション; 脂肪細胞; レプチン; 腫瘍壊死因子

(1)ストレッチ刺激を与えた肺動脈組織、肺動脈由来培養平滑筋細胞(PASMC)、同・内皮細胞(PAEC)いずれにおいても接着斑キナーゼ(FAK)のチロシンリン酸化が亢進すること、(2)肺動脈組織およびPASMCではFAK以外にも多数のチロシンリン酸化シグナルが同時に増大すること、(3)PASMC細胞膜表面でのPDGF受容体β(Rβ)の発現増大が起こること、(4)肺高血圧モデル動物の肺動脈組織では選択的にRβの構成的発現量の増大が起こっていることを見いだした(Tanabe Y.et al.,Mol.Cell.Biochem.215:103-113,2000)。FAKが活性化することから、ストレッチのような機械的力学刺激を感受する機構の一部は接着因子インテグリンを介していると考えられた。また、これらの反応は即時的収縮能を失った培養平滑筋細胞でも起こることから、増殖や病的組織再構築等の中長期の細胞応答に関連したものであり、過剰な血行力学因子によりRβの発現が高まると血管平滑筋細胞の増殖や遊走が増大し、血管の狭窄や緊張性が増加し更に血圧が高まるといった悪循環機構の存在を示唆する。一方、以前筆者らは肺動脈にストレッチ刺激を与えると、血管収縮活性を持つトロンボキサンA_2(TxA_2)が内皮から産生され、弛緩性のプロスタグランジン(PG)I_2との相対的量比により即時的収縮を発生することを報告した(Nakayama K.,et al.,Br.J.Pharmacol.122:199-208,1997)。TXA_2は肺高血圧病態に関与する重要なメディエーターと考えられている。しかし、今回のより詳細かつ総合的な検討によれば、TXA_2以外にも血管収縮性PG類であるPGF_<2α>、PGE_2、PGH_2(SnCl_2存在下PGF_<2α>増加分として測定)等もストレッチ刺激を与えることにより内皮からの産生が増大することがわかった。さらにこのときインテグリン機構をRGDペプチド(RGD)により阻害すると、TxA_2、PGF_<2α>産生は完全に抑制されたが、PGE_2およびPGH_2産生は抑制されなかった。このとき収縮は殆ど抑制されなかった。RGDにより抑制されなかった2種のPGのうち、測定された程度のPGE_2量は肺動脈に与えても、収縮・弛緩のいずれも観察されなかったことから、収縮の主因ではないと考えられた。PGH_2はTxA_2と受容体が同一であり、受容体拮抗薬SQ29548やCOX阻害薬で収縮が完全に抑制されること、PGF_<2α>などより強い血管収縮活性を持つことなど考え合わせると、ストレッチで産生が増大し、RGDでも産生が抑制されない収縮物質の本体であることが示唆された(Saito M.,et al.,Jpn.J.Pharmacol.85 suppl.1:68P,2001)。

(1) ス ト レ ッ チ stimulus を and え た pulmonary tissue, pulmonary artery origin culture smooth muscle cells (PASMC), with endothelial cells (PAEC) い ず れ に お い て も then spot キ ナ ー ゼ (FAK () の チ ロ シ ン リ ン acidification が hyperthyroidism す る こ と, (2) pulmonary tissue お よ び PASMC で は FAK (outside に も most の チ ロ シ ン リ ン acidification シ グ ナ ル が に raised at the same time big す る こ と, (3) PASMC membrane surface で の PDGF beta beta (R) by let body の 発 now raised large が up こ る こ と, (4) high lung blood 圧 モ デ ル animal の pulmonary で は sentaku に R の raised large amount of beta の constitute 発 now since が こ っ て い る こ と を see い だ し た (Tanabe Y.e t al., Mol. Cell. Biochem. 215:103-113200). FAK (が activeness す る こ と か ら, ス ト レ ッ チ の よ う な machinery mechanical stimulation を feelings す る institutions の a は then factor イ ン テ グ リ ン を interface し て い る と exam え ら れ た. ま た, こ れ ら の anti 応 は instant 収 shrinkage can を lost っ た で culture smooth muscle cells も up こ る こ と か ら, raised や disease of the organization to build long-term の の cells 応 answer に masato even し た も の で あ り, turning な blood line mechanics factor に よ り R beta の 発 now が high ま る と vascular smooth muscle cell の raised colonization や wander が raised large し, blood vessels, narrow が raised with や tone の <s:1> higher に blood pressure が, まると った悪 った悪 circulatory mechanism <e:1>, を indicates する. One party, before the author ら は pulmonary に ス ト レ ッ チ stimulus を and え る と, vascular 収 shrinkage activity を つ ト ロ ン ボ キ サ ン A_2 (TxA_2) が endothelial か ら produce さ れ, flaccid の プ ロ ス タ グ ラ ン ジ ン (PG) I_2 と の polices of than に よ り instant 収 shrinkage を 発 raw す る こ と を report し た (Nakayama K., et al., Br. J. harmacol. 122:199-208199-7). TXA_2 is related to the pathological に of <s:1> pulmonary hyperhypertension and する is important なメディエ タ タ と と examination えられて る る. し か し, today back to の よ り detailed か つ 総 な of beg に 検 よ れ ば, TXA_2 に も vascular 収 shrinkage PG class で あ る PGF_ alpha < 2 >, PGE_2, PGH_2 (SnCl_2 PGF_ in the presence of alpha >, < 2 raised points と し て determination) such as も ス ト レ ッ チ stimulus を and え る こ と に よ り endothelial か ら が raised large す の Youdaoplaceholder0 とがわ った った. さ ら に こ の と き イ ン テ グ リ ン institutions を RGD ペ プ チ ド (RGD) に よ り resistance against す る と, TxA_2, PGF_ < 2 alpha > は に completely suppress さ れ た が, PGE_2 お よ び PGH_2 は an adverse さ れ な か っ た. <s:1> と と と constriction されな almost <e:1> inhibition されな った. RGD に よ り inhibit さ れ な か っ た two の PG の う ち, determining さ れ た degree の PGE_2 は pulmonary に and え て も, 収 shrinkage relaxation の い ず れ も 観 examine さ れ な か っ た こ と か ら, 収 shrinkage の main で は な い と exam え ら れ た. PGH_2 は TxA_2 と by let body が same で あ り, let body antagonism 薬 SQ29548 や COX inhibitor against 薬 で 収 shrinkage が に completely inhibit さ れ る こ と, PGF_ < 2 alpha > な ど よ り を hold strong い vascular 収 shrinkage activity つ こ と な ど exam え close わ せ る と, ス ト レ ッ チ で が raised large し, RGD で も が an adverse さ れ な い 収 Shrinkage material の ontology で あ る こ と が in stopping さ れ た (Saito m., et al., Jpn. J. harmacol. 85 suppl. 1:6 8 p, 2001).

项目成果

Tanabe,Y.,Masumoto,N.,Saito,M.,Ishikawa,T.,Obara,K.& Nakayama,K.: "Involvement of the tyrosine phosphorylation in mechanotransduction of vascular smooth muscle cells"The Japanese Journal of Pharmacology. 82(suppl.I). 10 (2000)

田边，Y.，增本，N.，斋藤，M.，石川，T.，小原，K.

中山貢一,斉藤麻希,田辺由幸,小原一男,石川智久: "脳血管のメカノトランスダクションとファスジルの作用"脳21. 36. 68-73 (2000)

Koichi Nakayama、Maki Saito、Yoshiyuki Tanabe、Kazuo Obara、Tomohisa Ishikawa：“脑血管的机械传导和法舒地尔的作用” Brain 21. 36. 68-73 (2000)

Sakai N,Nakayama K,Tanabe,Y.,Shozuhara H,Hiyoshi J,et al.: "Absense of plasma protease-antiprotease imbalance in the formation of saccular cerebral aneurysms"Neurosurgery. 45. 34-38 (1999)

Sakai N，Nakayama K，Tanabe，Y.，Shozuhara H，Hiyoshi J，等人：“囊状脑动脉瘤形成中血浆蛋白酶-抗蛋白酶失衡的缺失”神经外科。

Saito M,Tanabe,Y.,Masumoto N,Ishikawa T,Suzuki N,Obara K & Nakayama K.: "Differential participation of herbimycin A-sensitive tyrosine phosphorylation in the stretch-induced contraction of rabbit cerebral and pulmonary artery"The Japanese Journal of Pharm

斋藤 M、田边 Y.、增本 N、石川 T、铃木 N、小原 K

Masumoto N,Tanabe Y,Saito M,Nakayama K: "Attenuation of pressure-induced myogenic contraction and tyrosine phosphorylation by fasudil, a cerebral vasodilator, in rat cerebral artery."British Journal of Pharmacology. 130. 219-230 (2000)

Masumoto N，Tanabe Y，Saito M，Nakayama K：“法舒地尔（一种脑血管扩张剂）在大鼠脑动脉中减弱压力诱导的肌源性收缩和酪氨酸磷酸化。”英国药理学杂志。