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海洋性ビブリオ菌Na^+駆動型べん毛モーターの再構成系の構築

重建海洋弧菌Na^+驱动的鞭毛运动系统的构建

基本信息

批准号：
11780442
负责人：
佐藤健
金额：
$ 1.54万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research (2000)Nagoya University (1999)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2000
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11780442/
关键词：
再構成イオンチャネルべん毛モーター

项目摘要

海洋性細菌Vibrio alginolyticusの極毛はNa+駆動型のモータで回転し、そのトルク発生に必須な4種類(pomA,pomB,motX,motY)の遺伝子が同定されてきている。前年度までの研究実績から、これらのうちPomA,PomBタンパク質を複合体として精製することができ、プロテオリポソームに再構成したPomA/B複合体はNa+チャネル活性を示すことが明らかとなった。平成12年度は、この複合体中の各因子のストイキオメトリについての解析を行った。前年度までの研究結果から、PomAは単独で安定な2量体を形成していることから、この因子は2量体を最小単位として機能していることが予測される。そこで、遺伝子上でPomA分子をタンデムにつなげたPomA-PomAを構築し、PomA欠損株中で発現させたところ、この分子は正常に機能した。次に、PomAの機能を完全に失うP199L変異を、PomA-PomAの前半分(P199L-PomA)あるいは後ろ半分(PomA-P199L)に導入し、PomA欠損株中で発現させたところ、これらは機能を示さなかった。PomA分子が単独で機能しているのだとすると、PomA-PomA分子と比べてP199L-PomAあるいはPomA-P199L分子を発現させた場合では、その活性は約半分になることが予想される。ところが、P199L-PomA,PomA-P199Lともその機能を全く失ってしまうことから、PomA分子は2量体を最小単位として機能していることが明らかとなった。

The marine fungus Vibrio alginolyticus hairs and Na+ strains must be tested in the same way as those in the pomA,pomB,motX,motY class. In the previous year, we studied the activity of the PomA,PomB complex in the first half of the year, and then showed the activity of the PomA/B complex in the previous year. In Pingcheng 12, the factors in the complex were analyzed. The results of the previous year's trail study showed that PomA alone measured diazepam 2 to measure the body weight, and the factor 2 to measure the minimum position of body weight. The PomA molecules were detected on the spores and spores, and the PomA-PomA molecules were detected in the strains that were deficient in PomA, and the normal molecular capacity was detected. In the second stage, the PomA machine completely lost the P199L test, the first half of the PomA-PomA test (P199L-PomA), the second half of the cycle (PomA-P199L), the loss of blood pressure in the PomA strain, and the failure of the machine to show that the virus was damaged. The PomA molecule is used as a separate machine. The PomA-PomA molecule is more sensitive than the P199L-PomA molecule. The PomA-P199L molecule is more active than the PomA-P199L molecule. P199L copyright PomA, PomAmura, P199L, and P199L, and the molecular weight of PomA, which is the smallest position of molecular weight, can be used to detect the temperature of the machine.