アポトーシスに関与するJNKカスケードのスキャホールドタンパク質の解析

参与细胞凋亡的 JNK 级联支架蛋白分析

• 批准号: 11780451
• 负责人: 伊藤 道彦
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Kitasato University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11780451/
• 关键词: JNK; スキャホールドタンパク質; MAPK; JNKカスケード; ERKカスケード; 神経発生; ニューロン; JSAP1; MAPKカスケード; SEKI; MKK4; MEKK1

本研究はアポトーシスやストレス応答に関与するJNKカスケードの制御機構の解明を目的として、このカスケードの3つのキナーゼを空間的に接近させシグナル伝達を促進させるスキャホールドタンパク質JSAP1に関して、以下の解析を行った。1.JNKカスケードのスキャホールドタンパク質JSAP1のERKカスケードにおけるサプレッサーとしての機能解析.(1)JSAP1は、細胞増殖や分化のシグナル伝達に関与するMAPKカスケードの1つ、ERKカスケードのメンバーであるcRaf1(MAPKKK)とMEK1(MAPKK)と両者ともに、C末端約200アミノ酸の領域で相互作用する。(2)JSAP1は、フォルボールエステル(TPA)によるERKカスケードの活性化を抑制する。(3)JSAP1は、cRaf1との結合により、cRaf1からMEK1のリン酸化を阻害する。以上の結果より、JNKカスケードのスキャホールドタンパク質JSAP1は、ERKカスケードを抑制する多機能なMAPKカスケード制御タンパク質であり、2つのカスケード間のクロストークを含めバランスを制御するメデイエータータンパク質である可能性がある。<Kuboki,Y.,Ito.M.et al.J.Biol.Chem.275,39815-39818(2000):Ito.M.et al.Gene 255,229-234(2000)>2.マウス神経発生過程および成体脳における免疫組織学的解析.(1)JSAP1は、マウス発生過程において脳、脊髄神経系で発現が認められ、ニューロン前駆細胞ではなく、分化が決定したニューロンに発現が多い。また、その細胞内局在は核ではなく細胞体と軸索である。(2)JSAP1は、成体脳においてほぼすべてのニューロンの細胞体でその存在が認められる。また、海馬CA3領域のピラミダルニューロンでは細胞体と樹状突起にその存在が認められ、ストレスによる神経細胞死との連関が考えられる。<Akechi,M.,Ito.M.et al.,Neurosci.Res.(2001)in press>

This study は ア ポ ト ー シ ス や ス ト レ ス 応 answer に masato and す る JNK カ ス ケ ー ド の system royal institution の interpret を purpose と し て, こ の カ ス ケ ー ド の 3 つ の キ ナ ー ゼ を space に close さ せ シ グ ナ ル 伝 da を promote さ せ る ス キ ャ ホ ー ル ド タ ン パ ク qualitative JSAP1 に masato し て line, the following の analytic を っ た. 1. JNK カ ス ケ ー ド の ス キ ャ ホ ー ル ド タ ン パ ク qualitative JSAP1 の ERK カ ス ケ ー ド に お け る サ プ レ ッ サ ー と し て の function resolution. (1) JSAP1 は や differentiation, cell rights colonization の シ グ ナ ル 伝 da に masato and す る MAPK カ ス ケ ー ド 1 つ の, ERK カ ス ケ ー ド の メ ン バ ー で あ る cRaf1 ( MAPKKK)とMEK1(MAPKK)と two と に に and approximately 200ア ノ at the c-terminal acid <s:1> domain で interaction する. (2)JSAP1 する, フォ ボ ボ ボ エステ エステ ド (TPA)によるERKカスケ ド ド <s:1> <s:1> activation を inhibition する. (3)JSAP1 と and cRaf1と combine with によ and cRaf1 らMEK1 <s:1> to acidify を and inhibit する. の above results よ り, JNK カ ス ケ ー ド の ス キ ャ ホ ー ル ド タ ン パ ク qualitative JSAP1 は, ERK カ ス ケ ー ド を inhibit す る function more な MAPK カ ス ケ ー ド suppression タ ン パ ク qualitative で あ り, 2 つ の カ ス ケ ー ド between の ク ロ ス ト ー ク を containing め バ ラ ン ス を suppression す る メ デ イ エ ー タ ー タ ン パ ク qualitative で あ が る possibilities Youdaoplaceholder0. Kuboki,Y.,Ito.M.et al.J.Biol.Chem.275,39815-39818(2000):Ito.M.et al.Gene 255229-234 (2000) > 2. マ ウ ス god 経 発 birth process お よ び adult 脳 に お け る immune histologic analysis. (1) JSAP1 は, マ ウ ス 発 birth process に お い て 脳, spinal marrow god 経 で 発 が now recognize め ら れ, ニ ュ ー ロ ン 駆 cells before で は な く, differentiation が decided し た ニ ュ ー ロ ン に 発 が い more now. Youdaoplaceholder0 and そ are located within the cell in the で nucleus で なく なく cell body と axon である. (2) There is が recognition められる in JSAP1, adult 脳にお 脳にお てほぼすべて <s:1> ニュ ニュ ロ <s:1> <s:1> <s:1> <s:1> <s:1> <s:1> でそ でそ. ま た, hippocampal CA3 field の ピ ラ ミ ダ ル ニ ュ ー ロ ン で は cell body と dendritic protrusions に そ の is が recognize め ら れ, ス ト レ ス に よ る 経 cell death god と の even masato が exam え ら れ る. <Akechi,M.,Ito.M.et al.,Neurosci.Res.(2001)in press>

项目成果

Akzchi,M.,Ito.M.,Uemura,K., et.al.: "Expression of JNK cascade scaffold protein JSAP1 in the mouse nervous system"Neurosci.Res.. (in press). (2001)

Akzchi,M.、Ito.M.、Uemura,K. 等人：“JNK 级联支架蛋白 JSAP1 在小鼠神经系统中的表达”Neurosci.Res..（出版中）。

Satoru Koyano: "A Novel Jun N-terminal Kinase(JNK)-binding protein that enhace the activation of JNK by MEK Kinase 1 and TGF-β-activated Kinase 1"FEBS Letters. 457・3. 385-388 (1999)

Satoru Koyano：“一种新型 Jun N 末端激酶 (JNK) 结合蛋白，可增强 MEK 激酶 1 和 TGF-β 激活激酶 1 的 JNK 激活”FEBS Letters 457·3 (1999)。

Michihiko Ito: "JSAP1, a Novel Jun N-terminal Protein Kinase(JNK)-Binding protein that Functions as a scaffold factor in the JNK Signaling Pathway"Molecular and Cellular Biology. 19・11. 7539-7548 (1999)

伊藤道彦：“JSAP1，一种在 JNK 信号通路中充当支架因子的新型 Jun N 末端蛋白激酶 (JNK) 结合蛋白”，《分子与细胞生物学》19·11 (1999)。

Ito,M.,Akechi,M.,Hirose,R. et al.: "Isoforms of JSAP1 scaffold protein generated through alternative splicing"Gene. 255・2. 229-234 (2000)

Ito, M.、Akechi, M.、Hirose, R. 等：“通过选择性剪接生成的 JSAP1 支架蛋白的异构体”基因 255・2。

Kuboki,Y.,Ito.M.,Takanatsu,N., et al.: "A scaffold protein in the c-Jun NH_2-terminal kinase signalling pathways suppresses the extracellular signal-regulated kinase signalling pathways"J.Biol.Chem.. 275・51. 39815-39818 (2000)

Kuboki, Y.、Ito.M.、Takanatsu, N. 等人：“c-Jun NH_2 末端激酶信号传导途径中的支架蛋白可抑制细胞外信号调节的激酶信号传导途径”J.Biol.Chem。 275・51。39815-39818（2000）