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両生類の変態におけるアポトーシス細胞の排除機構に関する研究

两栖类变态过程中凋亡细胞清除机制的研究

基本信息

批准号：
12740458
负责人：
岩室祥一
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Toho University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2001
项目状态：
已结题

项目摘要

ユビキチン(Ub)-プロテアソーム系は、細胞内におけるタンパク質分解系の一種であり、細胞周期の調節や免疫機構における抗原提示などに、大きな役割を果たしている。両生類の変態において、幼生の体を構築していた細胞の多くはアポトーシスにより死滅することが知られている。変態における細胞死は、特に尾部などの完全に消失する器官において、同調的に起こる必要性があることから、Ub-プロテアソーム系の関与が強く予測された。そこで、アフリカツメガエルの幼生の尾部を発生段階ごとに集め、その溶解液をSDS-PAGEで分離した後、抗mono-Ub抗体を用いたウエスタンブロッティングを行ったところ、変態期に特異的に出現する20、30、50kDaのバンドを検出することができ、変態におけるUb-プロテアソーム系によるタンパク分解の関与が示唆された。さらに、変態始動期の幼生尾部を器官培養し、甲状腺ホルモンを添加して変態を誘導してみたところ、甲状腺ホルモン特異的に出現する25kDaのバンドが検出できた。現在、これらのバンドのアミノ酸配列を解析中である。また、転写因子でもあり、変態を直接的に調節する甲状腺ホルモン受容体タンパク質(TRβ)について、その分解におけるUb-プロテアソーム系の関与を検討するため、ツメガエルTRβ特異的な抗体を作製し、さらにグルタチオン-S-トランスフェラーゼ(GST)との融合タンパク質を作製したところである。今後は、これらを用いて、TRβのUb化の有無の検出を行う予定である。また、両生類の変態において、TRβが転写活性能を発現するためには、核内において、レチノイドX受容体(RXR)とのヘテロ2量体形成が必要であることから、RXRタンパク質の分解におけるUb-プロテアソーム系の関与についても、今後の検討事項と考えている。

Antigens (Ub) are isolated from the immune organs of the immune machinery, and the fruits are cut off in large quantities. In terms of health and health, children and young adults do not know how to live in the hospital. The cell is dead, the tail is dead, the organ is dead, the necessity is the same, the Ub- is dead, the tail is dead, the tail is dead, the organs are dead. The tail of the baby, the tail of the baby, the tail The status is related to the Ub- and the instigation. During the initial period, the tail of the infant was organ cultured, the thyroid gland was added, and the 25kDa of the thyroid gland was detected. At present, we are in the process of analyzing the distribution of acid. The antibodies of TR β specific antibodies, which are directly expressed in the thyroid gland, the recipient (TR β), the recipient, the Ub-, the specific antibody, the receptor, the thyroid gland, the thyroid gland, the thyroid gland This is the most important thing in the world. This is not a good idea. In the future, we will use TR β-Ub to make sure that there is a pre-determined response. In this paper, the results are as follows: in the system, in vivo, in the nucleus, in the body, in the body of the recipient (RXR), the weight of the recipient (RXR) was measured in order to make sure that it was necessary to improve the performance of the system, the Ub- system, the system, and so on.