ウシ初期胞状卵胞由来卵子を用いた卵子選抜機構に関する研究

牛早期窦卵泡卵母细胞选择机制的研究

• 批准号: 12760183
• 负责人: 永野 昌志
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12760183/
• 关键词: ウシ; 初期胞状卵胞; 体外培養

平均直径843±171μmの初期胞状卵胞をFSHを添加した培地中で、8日間培養を行うと平均直径は903±255μmに増加し、培養前におよそ90μmであった卵子の直径も124±3μmに増加していた。一方、初期胞状卵胞をFSHの添加なしに8日間培養した場合、卵胞直径は845±277μmから878±314μmとほとんど変化は見られなかったが、卵胞内卵子の直径は120±15μmに増加していた。しかし、この場合の卵子直径の増加は主に卵子の変性に起因していると考えられた。これら体外で培養した卵胞の組織学的検索を行った結果、培養前は卵胞内の顆粒層細胞に多く発現していたProliferating Cell Nuclear Antigen(PCNA)が8日間培養後では全く発現しておらず、細胞は死滅していく過程にあることが示唆された。また、卵子を覆う卵丘細胞層も薄くなり、FSHを添加しない場合は完全に裸化した卵子の割合が増える傾向にあった。これらの結果から、初期胞状卵胞を体外で培養する場合、FSHの添加が必要であろうこと、また、本実験の条件下では8日間の培養では長すぎることが示唆された。そこで、培養期間を6日間に短縮し、同様の実験を行った。FSHを添加して培養を行った場合は、初期胞状卵胞の直径は770±189μmから827±214μm、FSH無添加の場合は、831±225μmから865±235μmへと変化した。また、採取される卵子の直径はそれぞれ106±11μmおよび107±7μmであった。FSH添加培養卵胞から採取された卵子は体内で発育した卵子に比べて卵丘細胞の付着量が少ないものの、FSH無添加で培養した卵胞由来卵子よりも付着量の多い傾向にあった。これら体外培養卵胞由来卵子の核相を調べた結果、FSHを添加して培養した卵胞由来卵子の方が卵核胞期にとどまっている割合が高い傾向にあった。

The average diameter of the initial cellular oocytes was 843±171μm, and the average diameter of the eggs increased from 903±255μm to 124±3μm before culture. When FSH is added to the initial cellular oocytes during 8 days of culture, the diameter of the oocytes changes from 845±277μm to 878±314μm, and the diameter of the eggs in the oocytes increases from 120±15μm. The increase in egg diameter in this case is due to the change in egg sex. The results of histological examination of oocytes cultured in vitro showed that the cells in the granular layer of oocytes appeared more frequently before culture than after culture for 8 days, and the cells disappeared completely after culture. The egg is covered with cumulus cell layer, FSH is added, and the egg is completely naked. In the case of culture in vitro, FSH addition is necessary for 8 days. The cultivation period is shortened by 6 days, and the cultivation period is shortened by 6 days. The diameter of the initial cellular oocytes changed from 770±189μm to 827±214μm when FSH was added, and from 831±225μm to 865±235μm when FSH was not added. The diameter of the egg is 106±11μm. FSH added to cultured egg cells, taken from eggs, developed in vivo and tended to pay less than cumulus cells, without FSH added to cultured egg cells. In vitro culture of eggs from the origin of nuclear phase regulation results, FSH added to the culture of eggs from the origin of nuclear phase of eggs from the high tendency to cut

项目成果

永野昌志,猪川真紀,山本直人,片桐成二,高橋芳幸: "ウシの初期胞状卵胞および一次卵胞の体外培養"北海道牛受精卵移植研究会会報. 19. 8-13 (2000)

Masashi Nagano，Maki Inokawa，Naoto Yamamoto，Seiji Katagiri，Yoshiyuki Takahashi：“牛早期窦卵泡和初级卵泡的体外培养”北海道牛受精卵移植研究组通报19. 8-13（2000）。

永野昌志: "ウシの初期胞状卵胞および一次卵胞の体外培養."北海道牛受精卵移植研究会会報. 19. 8-13 (2000)

Masashi Nagano：“牛早期窦卵泡和初级卵泡的体外培养。”北海道牛受精卵移植研究组通报。19. 8-13 (2000)。