肝細胞癌に対するHGF、HB-EGF遺伝子治療の研究

HGF和HB-EGF基因治疗肝细胞癌的研究

• 批准号: 12770287
• 负责人: 弓削 健太郎
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: Kurume University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12770287/
• 关键词: HGF; HB-EGF; CAGプロモーター; 肝癌細胞特異的; アデノウイルス; レトロウイルス; In vitro ligation法

HGFおよびHB-EGFをより強力なCAGプロモーターや肝癌細胞特異的なプロモーターにて発現させるため、アデノウイルスベクターの再構築を行った。今回新しいアデノウイルス作成法であるIn vitro ligation法を用いた。現在のところ動物実験にもくり返し使用できる様、ウイルスを大量増幅させている段階である。HGFの発現レベルをELISAにて測定した結果、従来当研究室で用いてきたRSVプロモーター使用のHGF発現アデノウイルスよりも今回作成したCAGプロモーター使用のHGF発現アデノウイルスのほうがはるかに高発現であった(数十倍から数百倍)。HB-EGFの発現レベルはELISAにて現在測定中である。同様にレトロウイルスにおいてもHGFおよびHB-EGFをより強力かつ組織特異的に発現するよう、プラスミドを構築中である。肝癌細胞を初めてとして、各種癌細胞にてHGFおよびHB-EGFの作用を解析している段階である。(サイトカインの細胞内シグナル伝達系とのクロストーク、アポトーシスとの関与など)ヌードマウスやSCIDマウスに肝癌細胞を初めとして各種癌細胞を種々の臓器や部位に移植実験を行っているところである。また実際に今回作成したアデノウイルスを実際に実験動物に導入し副作用を解析中である。プロモーターについてはより組織、臓器特異的に目的遺伝子を発現させるため、プロモーター領域に変異などを導入し、レポーターアッセイを計画しているところである。

HGF お よ び HB EGF - を よ り powerful な the CAG プ ロ モ ー タ ー や liver cancer cell specific な プ ロ モ ー タ ー に て 発 now さ せ る た め, ア デ ノ ウ イ ル ス ベ ク タ ー の line to build を っ た. This time, the new production method であるIn vitro ligation を uses た た. Now の と こ ろ animals be 験 に も く り return し use で き る others, ウ イ ル ス を lots of rights of さ せ て い る Duan Jie で あ る. HGF の 発 now レ ベ ル を ELISA に て determination し た results, 従 to when laboratory で い て き た RSV プ ロ モ ー タ ー use の HGF 発 now ア デ ノ ウ イ ル ス よ り も today back into し た the CAG プ ロ モ ー タ ー use の HGF 発 now ア デ ノ ウ イ ル ス の ほ う が は る か に high 発 now で あ っ た (dozens of times か ら hundreds of times). HB-EGF <s:1> occurrence レベ レベ <s:1> ELISAにて is currently being measured である. With others in に レ ト ロ ウ イ ル ス に お い て も HGF お よ び HB EGF - を よ り powerful か つ tissue specific に 発 now す る よ う, プ ラ ス ミ ド を building in で あ る. Early liver cancer cells を め て と し て, various kinds of cancer cells に て HGF お よ び HB - function EGF の を parsing し て い る Duan Jie で あ る. (サ イ ト カ イ ン の intracellular シ グ ナ ル 伝 da system と の ク ロ ス ト ー ク, ア ポ ト ー シ ス と の masato and な ど) ヌ ー ド マ ウ ス や SCID マ ウ ス に early liver cancer cell を め と し て various cancer cells を kind 々 の viscera や parts be に transplantation 験 を line っ て い る と こ ろ で あ る. Youdaoplaceholder0 real world に this time, it is presented as <s:1> たアデノウ スを スを スを real world に experimental animals に imported into を side effects を analysis である. プ ロ モ ー タ ー に つ い て は よ り organization and viscera に purpose of specific 伝 son を 発 now さ せ る た め, プ ロ モ ー タ に ー field - different な ど を import し, レ ポ ー タ ー ア ッ セ イ を project し て い る と こ ろ で あ る.