β受容体を介する自己免疫機序が特発性心筋症の成因に果たす役割

β受体介导的自身免疫机制在特发性心肌病发病机制中的作用

• 批准号: 12770356
• 负责人: 岩田 道圭
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12770356/
• 关键词: β受容体; 自己免疫; 特発性心筋症

1.自己免疫性心筋症モデルの作成:β1アドレナリン受容体の第2細胞外ループのペプチド(HWWRAESDEARRCYNDPKCCDFVTNRを合成し、1ヶ月に1回アジュバントとともに3〜6ヶ月間日本白色家兎に免疫した(免疫群)。2.Enzyme-linked immunosorbent assay:免疫開始1ヶ月後より兎血清中に自己抗体(IgG isotype)が生成され、観察期間中抗体価の上昇は持続した。3.血漿および心筋中のノルエピネフリン濃度:免疫群とアジュバントのみを接種した対照群の間でいずれも有意差を認めなかった。4.兎心筋を用いた検討(1)β受容体assay:免疫開始3ヵ月後には免疫群でβ受容体高親和性結合部位の減少を認めた。さらに6ヵ月後には免疫群でβ1受容体数の減少を認めたが、β受容体の総数は不変であった。(2)Adenyly cyclase(AC)活性測定:免疫開始3ヵ月後には免疫群でイソプロテレノール刺激下でのAC活性の低下を認めた。6ヵ月後には免疫群でbasalおよびGpp(NH)p刺激下でのAC活性の低下を認めた。(3)Western blotting:免疫開始3ヵ月後には免疫群でG protein-coupled receptor kinase(GRK)5の発現増加を認めた。6ヵ月後には免疫群でGRK5に加え、Gi蛋白の発現増加を認めた。Gs蛋白およびGRK2の発現については不変であった。(4)病理組織学的検討:免疫開始3ヵ月後には免疫群で炎症性細胞浸潤を認めた。免疫開始6ヵ月後には細胞浸潤はほとんど認めなかったが、免疫群では心筋細胞の肥大、線維化、配列の乱れを認めた。5.抗体の生理活性の検討:免疫群の兎血清より精製したIgGはin vitroにおいて、単離処理した兎心筋のβ受容体に対するagonist活性を示した。

1. Autoimmune cardiomyopathy モデルの is made: β1アドレナリン receptor 2nd extracellular ループのペプチド (HWWRAESDEARRCYNDPKCCD FVTNRをsyntheticし, 1ヶ月に1期アジュバントとともに3~6月日日本白家兎にimmuneした (immune group) 2.Enzyme-linked. immunosorbent assay: Autoantibodies (IgG) in the serum of Yokohama 1 month after the start of immunization isotype) was generated, and the number of antibodies increased during the observation period. 3. Concentration of blood plasma in heart muscle: immune group bloodントのみをvaccinationした対肖群の间でいずれも intentionally differs をcognizes めなかった. 4. The heartstrings are used for the purpose. Discussion (1) β-receptor assay: Three months after the start of immunization, it was found that the number of high-affinity β-receptor binding sites in the immune group decreased. After 6 months, it is recognized that the number of β1 receptors in the immune group has decreased, and the number of β1 receptors has not changed. (2)Adenily Cyclase (AC) activity measurement: 3 months after the start of immunization, the AC activity of the immune group was reduced under the stimulation of the immune system. After 6 months, it was recognized that the AC activity of the immune group was low under the stimulation of Gpp(NH)p. (3) Western blotting: G protein-coupled receptor of the immune group 3 months after the start of immunity The number of kinase(GRK)5 is now increasing. After 6 months, the immune group of GRK5 has been increased, and the increase of Gi protein has been confirmed. Gs protein is not the same as GRK2. (4) Histopathological examination: 3 months after the start of immunization Immune group and inflammatory cell infiltration are recognized. Six months after the start of immunization, there was evidence of cell infiltration, hypertrophy, linear dimensionalization, and disordered arrangement of cardiomyocytes in the immune group. 5. Antibody physiological activity: Immune group serum purified IgG In vitroにおいて、isolated processingした兎心丝のβ acceptorに対するagonist activityをshowした.

项目成果

Michikado Iwata: "Autoimmunity against the solond extracellular loop of β1-adrenergic receptors induces β-adrenergic receptor desensi tization and myocardial hypertrophy in vivo"Circulation Research. (in press).

Michikado Iwata：“针对 β1-肾上腺素能受体单独细胞外环的自身免疫会诱导体内 β-肾上腺素能受体脱敏和心肌肥大”循环研究（正在出版）。