オンコスタチンMによる血管リモデリング機序解明とSOCS-1導入による遺伝子治療

1)培養血管平滑筋細胞(VSMC)遊走機能に対するOMの作用。これまで培養血管平滑筋細胞(VSMC)を使って、ウェスタンブロット法や、PCR法により、OM投与により、ERK系に関連したシグナリングとして、間質マトリクス代謝に影響があることが確認できた。確認できた間質マトリクス代謝系への影響としては、MMP9があり、ゼラチンザイモグラフィーにて、その活性上昇を認めた。そしてFAK染色により、細胞形態の変化を確認できたが、遊走能に関連した変化と考えられた。これらの変化はERK系を特異的にブロックすることで消失した。また、JAK-STAT系に関連したシグナリングとしてSTAT3の活性化を確認しており、ドミナントネガティブを遺伝子導入することで、JAK-STAT系が間質マトリクス代謝に関係しないことを確認した。2)ラットへのSOCS-1遺伝子導入による遺伝子治療SOCS-1遺伝子in vivo導入のため、ダブル・バルーン法にて、バルーン損傷時にラット頚動脈にin vivo遺伝子導入する系を確立中である。現在、ルシフェラーゼおよびSOCS-1組み込みベクターをHVJリポソームに封入し、ダブル・バルーン法にて、バルーン損傷時にラット頚動脈にin vivo遺伝子導入する系の確立を施行している。これまでにバルーン損傷時における再生内膜肥厚部位にて、Jak-STAT系蛋白の発現や、MMP9の発現を確認しているため、バルーン損傷時にSOCS-1遺伝子を導入したラットと対照ラットにおける再生内膜肥厚の程度・MMP9やJak-STAT系蛋白の発現・活性化レベルを比較検討中である。

1)培養血管平滑筋細胞(VSMC)遊走機能に対するOMの作用。これまで培養血管平滑筋細胞(VSMC)を使って、ウェスタンブロット法や、PCR法により、OM投与により、ERK系に関連したシグナリングとして、間質マトリクス代謝に影響があることが確認できた。確認できた間質マトリクス代謝系への影響としては、MMP9があり、ゼラチンザイモグラフィーにて、その活性上昇を認めた。そしてFAK染色により、細胞形態の変化を確認できたが、遊走能に関連した変化と考えられた。これらの変化はERK系を特異的にブロックすることで消失した。また、JAK-STAT系に関連したシグナリングとしてSTAT3の活性化を確認しており、ドミナントネガティブを遺伝子導入することで、JAK-STAT系が間質マトリクス代謝に関係しないことを確認した。2)ラットへのSOCS-1遺伝子導入による遺伝子治療SOCS-1遺伝子in vivo導入のため、ダブル・バルーン法にて、バルーン損傷時にラット頚動脈にin vivo遺伝子導入する系を確立中である。現在、ルシフェラーゼおよびSOCS-1組み込みベクターをHVJリポソームに封入し、ダブル・バルーン法にて、バルーン損傷時にラット頚動脈にin vivo遺伝子導入する系の確立を施行している。これまでにバルーン損傷時における再生内膜肥厚部位にて、Jak-STAT系蛋白の発現や、MMP9の発現を確認しているため、バルーン損傷時にSOCS-1遺伝子を導入したラットと対照ラットにおける再生内膜肥厚の程度・MMP9やJak-STAT系蛋白の発現・活性化レベルを比較検討中である。