表皮ケラチノサイトにおける新規MAPキナーゼBMK1の研究

表皮角质形成细胞中新型MAP激酶BMK1的研究

• 批准号: 12770446
• 负责人: 藤山 幹子
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Ehime University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12770446/
• 关键词: 角化細胞; BGF family; auto-induction; cross-induction; BMK1; adenovirus vector; ケラチノサイト; adenovirus vector.; EGF; autocrine; dominant negative

MAPキナーゼカスケードは、細胞成長因子、細胞分化因子、ストレス刺激などの細胞外刺激を細胞内に伝達する重要なシグナル伝達経路であり、MAPKKK、MAPKK、MAPKの三段階のキナーゼによるカスケードからなる。MAPKとして、MAPK/ERK、p38、SAPK/JNKが知られていたが、最近、ERK5/BMK1の存在が明らかとなった。BMK1はEGFによる刺激でリン酸化され、核内に移行し、転写因子MEF2Cを活性化することが明らかとなっている。注目すべきことに、不活性型BMK1を発現した細胞では、GO/G1期に集合し、増殖停止を起こすことが知られている。EGFファミリー細胞成長因子は、10数種類存在するが、表皮細胞では、TGF-alpha、amphiregulin、HB-EGF、epiregulinが産生され、au t ocrine様式で作用する。このようなEGFファミリー細胞成長因子による作用の表皮内シグナル伝達経路については、表皮細胞では研究されておらず、他の細胞における報告から、Raf、MEKl/2、MAPK/ERKのカスケードの関与が想定されていた。しかし、最近のBMK1に関する研究は、むしろERK5/BMK1が重要であることを示唆するものである。表皮細胞におけるEGFファミリー細胞成長因子のautocrine作用機構の検討EGFファミリー細胞成長因子によるBMK1リン酸化の検討TGF-alpha、amphiregulin、HB-EGF、epiregulinを表皮ケラチノサイトの培養上清に添加し、細胞抽出物を回収しウェスタンブロツト法にてBMK1のリン酸化を検討したところ、表皮角化細胞においてはBMK1のリン酸化は認められなかった。Ad-DNBMK1およびのAd-DNERK5のautocrine機構への影響の検討TGF-alpha、amphiregulin、HB-EGF、epiregulin添加時の表皮ケラチノサイトの増殖促進効果がAd-DNBMK1およびのAd-DNERK5のtransfectにより抑制されるかどうかを、DNA合成を示標に検討したところ、DNA合成の抑制は認められなかった。Ad-DNBMK1およびAd-DNERK5をtransfectした表皮細胞に、TGF-alpha、amphiregulin、HB-EGF、epiregulinを添加し、それぞれのmRNAの誘導されるかについて、RT-PCR法を用いて検討したところ、EGF familyのautoinduction,ならびに、cross-inductionともに影響を与えなかった。以上の結果をまとめると、表皮角化細胞においてはBMKの経路はほとんど作用していないことが明かとなった。

MAPKK, MAPKK, MAPK, MAPK. MAPK, MAPK/ERK, p38, SAPK/JNK, ERK5/BMK1, etc. BMK1 responds to EGF stimulation by activating the transcription factor MEF2C. The expression of inactive BMK1 was detected in cells at GO/G1 stage, and the expression of inactive BMK1 was detected at GO/G1 stage. EGF and epidermal growth factors exist in more than 10 species, and epidermal cells produce TGF-alpha, amphiregulin, HB-EGF, epiregulin, and autoline. The study of EGF, MEK1/2 and MAPK/ERK in epidermal cells was carried out in response to reports of epidermal cell growth factors. Recent studies on ERK5/BMK1 have shown that EGF, HB-EGF, Epiregulin, EGF, EGF, Effects of Ad-DNERK 1 and Ad-DNERK5 on the Autocrine Mechanism of Ad-DNERK 1 and Ad-DNERK5 were Investigated. Effects of TGF-alpha, Amphiregulin, HB-EGF, Epiregulin Addition on the Proliferation of Ad-DNERK 1 and Ad-DNERK5 were Investigated. Ad-DNBMK1 and Ad-DNERK5 are involved in epidermal cell, TGF-alpha, amphiregulin, HB-EGF and epiregulin transduction, mRNA induction and RT-PCR analysis. As a result, keratinized cells in the epidermis have a negative effect on the BMK pathway.

项目成果

Tohyama M, Shirakara Y, Yamasaki K, Sayama K, Hashimoto K: "Differentiated keratinocytes are responsible for TNF-alpha regulated production of macrophage inflammatory protein 3alpha/CCL20, a potent chemokine for Lnagerhans cells"Journal of Dermatological

Tohyama M、Shirakara Y、Yamasaki K、Sayama K、Hashimoto K：“分化的角质形成细胞负责 TNF-α 调节巨噬细胞炎症蛋白 3α/CCL20 的产生，巨噬细胞炎症蛋白 3α/CCL20 是 Lnagerhans 细胞的有效趋化因子”皮肤病学杂志