臍帯及び羊膜上皮細胞を用いた培養表皮シートの作製

利用脐带和羊膜上皮细胞制备培养表皮片

• 批准号: 12770457
• 负责人: 溝口 将之
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Juntendo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12770457/
• 关键词: 臍帯上皮; 培養表皮シート

既に我々は、臍帯上皮では表皮に類似した分化関連蛋白の発現を認め、さらに臍帯から上皮細胞を分離培養し、高カルシウム培地を用いて気相下培養を行うことにより、重層化させることが可能であることを報告した。13年度は、コラーゲンゲルを用いた三次元培養系により臍帯上皮細胞の性状についてさらに検討を行った。その結果、線維芽細胞を埋没したコラーゲンゲル上で培地中のカルシウム濃度を1.8mMに上昇させ、空気暴露(気相下培養)させ分化を誘導することにより、臍帯上皮細胞は10層前後にまで重層化し、フィラグリン抗体陽性のケラトヒアリン顆粒様の顆粒状構造物を上層部の核周囲に認め、さらにその上層において核は消失し角質層様の構造を形成した。免疫学的検索では皮膚型ケラチンK1/10を発現し、上層部においてトランスグルタミナーゼ、インボルクリン、ロリクリン等のcornified cell envelope associated proteinの発現を認め、これらは表皮ケラチノサイトより作製した培養表皮シートと同様の発現パターンを示した。さらに単層培養した臍帯上皮細胞をヌードマウスの皮膚欠損部に移植したところ、気相下培養時と同様に重層化し生着した。これらの結果は、臍帯上皮細胞を用いて表皮シートを作製し、臨床応用することが可能であることを示すものである。さらに現在は、各種コラーゲン、インテグリン、ラミニン等の基底膜構成成分の経時的発現について検討を進めている。

Both the umbilical cord epithelium and the epidermis are similar, and the differentiation-related protein is present and recognized, and the umbilical cord epithelial cells are isolated and cultured. , high カルシウム地を Use いて気phase culture を行うことにより, double stratified させることがpossible であることを report した. In 2013, the company used the three-dimensional culture system of umbilical cord epithelial cells to study the characteristics of umbilical cord epithelial cells.そのRESULTS, LINE-DIMENSIONAL BUD CELL BUYED したコラーゲンゲル上でPE地中のカルシウムconcentrationを1.8m M rise and fall, exposure to air (cultivated under water phase), differentiation and induction, umbilical cord epithelial cells 1 Before and after layer 0, the double-layered structure of the にまでし, the フィラグリン antibody-positive のケラトヒアリン granular material The core of the upper layer has disappeared, and the stratum corneum structure has been formed. Immunological examination of skin type K1/10 skin type skin type skin type K1/10 skin type skin type skin type skin type K1/10 skin type skin type skin type skin type cornified cell envelope associated protein の発appears をcognition め、これらはepidermis ケラチノサイトより making した cultured epidermis シートと同様の発 appear パターンをshow した. The umbilical cord epithelial cells were cultured in a single layer and transplanted into the defective part of the skin. When cultured under the same phase, the cells were multi-layered and transplanted.これらのRESULTS は, umbilical cord epithelial cells を いて epidermis シートを production し, clinical use することがpossible であることをshow すものである. The basement membrane components such as the various コラーゲン, various コラーゲン, インテグリン, and ラミニン are the components of the basement membrane.

项目成果

Mizoguchi M,Ikeda S,Suga Y,Ogawa H: "Expression of cytokeratins snd cornified cell envelope-associated proteins in umbilical cord epithelium."THE JOURNAL OF INVESTIGATIVE DERMATOLOGY. 115. 133-134 (2000)

Mizoguchi M，Ikeda S，Suga Y，Okawa H：“脐带上皮中细胞角蛋白和角化细胞包膜相关蛋白的表达。”皮肤病学研究杂志。