気分障害・概日リズム睡眠障害における分子生物学的手法を用いた時間遺伝子の検討

使用分子生物学方法检查情绪障碍和昼夜节律睡眠障碍的时间基因

• 批准号: 12770524
• 负责人: 尾關 祐二
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Shiga University of Medical Science
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12770524/
• 关键词: 睡眠障害; 気分障害; hper1; 睡眠習慣; 概日リズム; 遺伝子

本年度は睡眠障害患者(睡眠相後退症候群:DSPS、非24時間概日リズム睡眠障害:N-24)及び双極性障害患者を対象に検体の収集を行った。DSPS患者は22名、N-24患者は5名、双極性障害患者は40名の検体を得ることができた。また、健常被験者に関しても134名の検体収集を行った。また同時に朝型-夜型質問紙表を用いて、健常被験者の睡眠習慣に関しての調査を行った。遺伝子解析に関してはまず、健常被験者1名より末梢血を採取し、単核球のみを分離した後、mRNAを抽出、RT-PCR法にてcDNAの作成を行った。こうして得られたcDNA中にhper1遺伝子が存在することが確認されたため、まず、患者10名を対象として、同様の方法でcDNAを作成した後、全長の遺伝子配列を検討した。5箇所の遺伝子多型が認められたが(a826a/c3名/10名a1828g9/10t2434t/c5/10 g2548g/a6/10 c3071c/g7/10)、そのうち4つに関してはアミノ酸の置換は生じないものであった。残り一箇所の遺伝子多型に関してはアミノ酸の置換が生じるため(c3071c/g,Pro→Ala)、この遺伝子多型はhper1蛋白の機能発現に影響が生じる可能性が考えられた。次に全患者及び健常被験者のゲノムを対象として、上記アミノ酸置換が生じる遺伝子多型の解析を行った。現在患者すべての解析は終了している。健常被験者に関しては現在進行中であり、20名の解析が終了している。健常者を対象として施行した朝型-夜型尺度と遺伝子多型との関連についても現在検討中である。20名を解析した時点では遺伝子多型と睡眠習慣の間に関連が認められているが、まだ結論には至っていない。睡眠障害の研究成果に関しては平成13年5月第97回日本精神神経学会にて、感情障害の研究成果に関しては平成13年4月に第23回日本生物学学的精神医学会にて発表の予定となっており、その後学術雑誌に投稿予定である。

今年，在患有睡眠障碍（DSP，非24小时昼夜节律睡眠障碍：N-24）和双相情感障碍的患者中收集了标本。从22例DSP，5例N-24患者和40例躁郁症患者那里获得样品。此外，收集了134个标本以进行健康受试者。同时，我们使用凌晨的问卷调查了健康受试者的睡眠习惯的调查。关于遗传分析，首先从一个健康的受试者中收集外周血，仅分离单核细胞，提取mRNA，并通过RT-PCR制备cDNA。由于已确认存在于这样获得的cDNA中存在HPER1基因，因此10名患者首先以相同的方式创建了cDNA，然后检查了全长基因序列。尽管观察到五种遗传多态性（A826A/3人/10人A1828G9/10T2434T/C5/10 G2548G/A6/10 C3071C/G7/10），但其中四个中没有氨基酸取代。由于其余的遗传多态性（C3071C/G，Pro→ALA）发生氨基酸取代，因此人们认为该基因多态性可能会影响HPER1蛋白的功能表达。接下来，分析了所有患者的基因组和健康受试者的遗传多态性，其中发生了上述氨基酸取代。目前，所有患者分析均已完成。目前，健康的受试者正在进行中，完成了20个分析。目前正在考虑在健康个体中进行的晨间晚期量表与遗传多态性之间的关系。分析20名患者时，遗传多态性和睡眠习惯之间存在联系，但尚未得出结论。睡眠障碍研究的结果将于2001年5月在日本第97届日本精神病学和神经病学学会上介绍，情绪障碍研究的结果将于2001年4月在日本生物和精神病学会第23届介绍，并将在后来的学术期刊上发布。