マウス実験モデルを用いた乳癌の腫瘍進展・転移に関わる遺伝子の解析-cDNA expression arrayによる遺伝子解析の基礎実験への応用

利用小鼠实验模型分析参与乳腺癌肿瘤进展和转移的基因 - cDNA表达阵列基因分析在基础实验中的应用

• 批准号: 12770670
• 负责人: 川瀬 和美
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Jikei University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12770670/
• 关键词: 乳癌; cDNA expression array

乳癌細胞の生物学的動態の違いがどの要因に起因するかを分子細胞学的に追究するため、本研究では新しい遺伝子制御のスクリーニング法を応用した基礎的な実験を計画した。本実験ではヌードマウス実験モデルを利用して高転移乳癌細胞株を作成し、乳癌細胞株が悪性化していく段階での遺伝子発現がどのように変化するかをcDNA expression arrayにて選択し、転移にかかわる遺伝子を突きとめることを目的とする。このスクリーニング法は対象とする組織あるいは物体(ウイルスなど)に発現しているRNAを抽出し、reverse transcriptaseによりcDNAを作成、放射性物質でマーキングして、あらかじめ膜上に配列された膨大な遺伝子情報と結合するcDNAをラジオグラフィにて選別するものである。この方法によりある特定の遺伝子だけに注目するのではなく、全般的な遺伝情報についてスクリーニングできる利点がある。高転移乳癌細胞株の作成を目的に平成13年度は乳癌細胞株MDA-MB-468を用い、ヌードマウスの尾静脈に5×10^6個の細胞を注射して肺転移を形成させる実験を試みた。肺転移巣が形成された段階で転移細胞のprimary cultureを行い、更に経代的に尾静脈注入から肺転移巣を作成することを目的とした。結果的には乳癌細胞の増殖が遅く、初代転移巣は得られたものの、経代しても高転移株は今のところ得られていない。更に経代実験を重ね、高転移株の出現を待って遺伝子変異の同定をする所存である。

This study aims to investigate the molecular cytology of breast cancer cell dynamics and its underlying causes. The present invention relates to a method for preparing a high-quality breast cancer cell line by using a cDNA expression array, wherein the cDNA expression array is selected from the cDNA expression array, and the cDNA expression array is selected from the cDNA expression array. The method of RNA extraction, reverse transcriptase, cDNA generation, and radioactive material alignment on the membrane and cDNA selection are used to detect and detect the presence of DNA in the tissue. This method is based on specific information, attention, and general information. In the 13th year, the breast cancer cell line MDA-MB-468 was injected into the tail vein of the rat. The primary culture of lung metastasis is performed in the stage of lung metastasis, and the tail vein injection is performed in the stage of lung metastasis. As a result, breast cancer cell proliferation, early stage migration, and high stage migration were achieved. In addition, the emergence of new generation plants and new generation plants is waiting for the existence of new generation plants.