肝虚血再潅流傷害におけるアポトーシスの発生と活性酸素消去剤によるその防止

肝缺血再灌注损伤中细胞凋亡的发生及其活性氧清除剂的预防作用

• 批准号: 12770817
• 负责人: 石井 久成
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12770817/
• 关键词: ラット; 肝臓; 虚血再灌流傷害; アポトーシス; 活性酸素消去剤; PBN; 肝細胞; リポポリ多糖類; 細胞傷害; 一酸化窒素; 誘導型一酸化窒素含成酵素

本年度はラットを用いて肝虚血再灌流傷害モデルを作成し、活性酸素消去剤の傷害抑制効果を検討した。(方法)1.全身麻酔下にラットを開腹し、肝門部において右葉への血流を遮断し、肝右葉虚血とした。1時間後、遮断を解除し再灌流を行った。薬物投与群では活性酸素消去剤であるPBNを虚血5分前に、75mg/kgを静脈内投与した。2.虚血前、再灌流直後、再灌流3時間後ならびに6時間後に採血し肝逸脱酵素(GOTならびにGPT)を測定した。3.再灌流6時間後に、門脈からコラゲナーゼを灌流し、虚血側と非虚血側に分けて肝細胞を分離採取した。分離採取した肝細胞はフローサイトメトリーを用いてDNAの断片化を測定することにより、アポトーシスの程度を評価した。(結果)1.虚血再潅流によりGOTならびにGPTは上昇したが、PBN投与群(n=6)では、再潅流3時間後ならびに6時間後の値がコントロール群(n=6)に比し有意に低かった(ともにp<0.01)。2.フローサイトメトリーでは、コントロール群でも、PBN投与群でも、DNA断片化を生じた細胞は、虚血側、非虚血側とも10%未満であった。これは肝細胞採取の段階でアポトーシスに陥った細胞が除去されたためと考えられIPBNの効果を評価するには至らなかった。以上より、PBNは肝虚血再灌流傷害を抑制することが明らかとなった。しかし、その抑制がアポトーシス抑制によるものかどうかは判明しなかった。

This year, the study of injury inhibition effects of active acid elimination agents was carried out. (Method)1. The whole body is numb and the blood flow of the right lobe of the liver is blocked. After 1 hour, the interruption was released and the reperfusion was performed. PBN was administered intravenously at a dose of 75mg/kg before the administration of active acid. 2. Blood samples were collected before deficiency, immediately after reperfusion, and 3 and 6 hours after reperfusion for determination of liver enzymes (GOT). 3. After 6 hours of reperfusion, the portal vein was separated from the liver and the liver cells were isolated from the non-empty blood side. To assess the extent of DNA fragmentation in isolated hepatocytes (Results)1. The number of PBN in the group (n = 6) was higher than that in the group (n = 6) after 3 days of rebleeding (p<0.01). 2. DNA fragmentation, cell proliferation, blood deficiency, non-blood deficiency, 10% non-proliferation. The liver cells were removed and the results were evaluated. The above mentioned PBN can inhibit liver deficiency reperfusion injury. The law of the land is the law of the land, and the law of the land is the law of the land.

项目成果

Kiichi Hirota,Hajime Nakamura,Toshiyuki Arai,Hisanari Ishii,Jie Bai,Tatsuya Ito,Kazuhiko Fukuda,Junji Yodoi: "Geranylgeranylacetone enhances expression of thioredoxin and suppresses ethanol-induced cytotoxicity in cultured hepatocytes"Biochemical and Biop

Kiichi Hirota、Hajime Nakamura、Toshiyuki Arai、Hisanari Ishii、Jie Bai、Tatsuya Ito、Kazuhiko Fukuda、Junji Yodoi：“香叶基香叶基丙酮增强培养肝细胞中硫氧还蛋白的表达并抑制乙醇诱导的细胞毒性”生化和活检

Hisanari Ishii, Toshiyuki Arai, Hajime Segawa, Shigehiro Morikawa, Toshiro Inubushi, Kazuhiko Fukuda: "Effects of propofol on lactate accumurlation and oedema formation in focal cerebral ischaemia in hyperglycaemic rats"British Journal of Anaesthesia. 88.

Hisanari Ishii、Toshiyuki Arai、Hajime Sekawa、Shigehiro Morikawa、Toshiro Inubushi、Kazuhiko Fukuda：“异丙酚对高血糖大鼠局灶性脑缺血中乳酸蓄积和水肿形成的影响”英国麻醉杂志。

Kouhei Yamashita, Toshiyuki Aral, Kazuhiko Fukuda, Hiroko Mori, Hisanari Ishii, Maiko Nishioka, Kunihiko Tajima, Keisuke Makino, Masataka Sasada: "6-Formyipterin intracellularly generates hydrogen Peroxide and restores the impaired bactericidal activity o

Kouhei Yamashita、Toshiyuki Aral、Kazuhiko Fukuda、Hiroko Mori、Hsanari Ishii、Maiko Nishioka、Kunihiko Tajima、Keisuke Makino、Masataka Sasada：“6-甲酰蝶呤在细胞内产生过氧化氢并恢复受损的杀菌活性

Toshiyuki Aral, Nobuyuki Endo, Kouhei Yamashita, Masataka Sasada, Hiroko Mori, Hisanari Ishi, Kiichi Hirota, Keisuke Makino, Kazuhiko Fukuda: "6-Formyipterin, a xanthine oxidase inhibitor, intracelliarly generates reactive oxygen species involved in apopt

Toshiyuki Aral、Nobuyuki Endo、Kouhei Yamashita、Masataka Sasada、Hiroko Mori、Hisanari Ishi、Kiichi Hirota、Keisuke Makino、Kazuhiko Fukuda：“6-甲酰蝶呤是一种黄嘌呤氧化酶抑制剂，在细胞内产生参与细胞凋亡的活性氧