HPV陰性子宮頸部癌の発癌機構の解明

阐明HPV阴性宫颈癌的致癌机制

• 批准号: 12770895
• 负责人: 三橋 暁
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Chiba University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12770895/
• 关键词: 子宮頸部癌; HPV; EGFR; cervical cancer; HPV negative

HPV陰性子宮頸部扁平上皮癌培養細胞株(C33A株,HT3株,我々の樹立したYUMOTO株)HPV陰性子宮頸部腺癌培養細胞株(TCO-1株,OMC-4株,NUZ株)HPV陽性子宮頸部扁平上皮癌(QG-U株,QG-H株,SKG-I株,SKG-II株,SKG-IIIa株,SKG-IIIb株,CaSki株)、HPV陽性子宮頸部腺癌培養細胞株(CAC-1株,HeLa株)を用い、まず細胞培養し、DNA、RNA抽出し、cDNA合成した。当院受診した子宮頸部扁平上皮癌39例、子宮頸部腺癌19例のDNAの抽出を行い、HPV-DNAの検察を行った。子宮頸部扁平上皮癌39例中3例7.7%、子宮頸部腺癌19例中5例26.3%がHPV陰性であった。近年多臓器の癌で末梢血中のEpidermal Growth Factor Receptor(EGFR)mRNAの発現が、偽陽性が少なく、微小腫瘍細胞検出に有用であるとの報告がある。本研究において子宮頸部癌患者における末梢血中EGFRmRNA発現を検討した。対象は上記症例中35例で、正常女性30例をコントロールとした。治療前に末梢血2ccを採取、RNAを抽出後、cDNAを合成し、CK19、CK20、EGFRのmRNA発現をGAPDHを内部標準とするRT-PCR法にて測定した。検出感度を1000-2000コピー程で測定した。正常コントロールではこの検出感度ではCK19、CK20、EGFRのmRNAを検出しなかったが、子宮頸癌においてCK19、CK20、EGFRのmRNAはそれぞれ5/35(16.7%)、0/35(0%)、13/35(37.1%)検出された。また上記培養細胞ではすべてEGFRmRNAが検出された。子宮頸部癌においてもCK19と同様、末梢血中EGFRmRNA発現が微小腫瘍細胞検出に有用である可能性が示唆された。今回の検討ではHPVの発現とEGFRmRNAの発現での関係は明らかではなかった。

HPV-negative cervical squamous cell carcinoma cell lines (C33A,HT3, and YUMOTO), HPV-negative cervical adenocarcinoma cell lines (TCO-1,OMC-4, and NUZ), HPV-positive cervical squamous cell carcinoma cell lines (QG-U,QG-H, SKG-I, SKG-II,SKG-IIIa, SKG-IIIb, and CaSki), and HPV-positive cervical adenocarcinoma cell lines (CAC-1,HeLa) were used for cell culture, DNA and RNA extraction, and cDNA synthesis. DNA extraction and HPV-DNA detection were performed on 39 cases of cervical squamous cell carcinoma and 19 cases of cervical adenocarcinoma diagnosed in the hospital. 3 cases (7.7%) of cervical squamous cell carcinoma and 5 cases (26.3%) of cervical adenocarcinoma were HPV negative. Epidermal Growth Factor Receptor(EGFR)mRNA in peripheral blood of multiple organ cancers has been reported in recent years. This study investigated EGFR mRNA expression in peripheral blood of patients with cervical cancer. 35 cases were diagnosed with symptoms and 30 cases were normal females. Before treatment, peripheral blood 2cc samples, RNA extraction, cDNA synthesis, CK19, CK20, EGFR mRNA expression and GAPDH internal standard were measured. The sensitivity of detection is 1000-2000 ℃. In normal cervical cancer, CK19, CK20 and EGFR mRNA were detected in 5/35(16.7%), 0/35(0%) and 13/35(37.1%) cases. EGFR mRNA expression in cultured cells was detected. The expression of EGFR mRNA in peripheral blood of patients with cervical cancer is helpful for the detection of small tumors. The relationship between HPV expression and EGFR mRNA expression is clear.