ヒト精子の成熟過程における精子PHGPxの生理的機能の解明

阐明精子PHGPx在人类精子成熟过程中的生理功能

• 批准号: 12770908
• 负责人: 水野 薫子
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: 山梨医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12770908/
• 关键词: PHGPx; sperm; selenium; mRNA

(1)ヒト精子PHGPx mRNAレベルと精子運動能との関連についての検討妊孕性の確認されている男性、および機能性不妊患者の精子を検体として、アフィニティーカラムを用いてtotal RNAを調製した。ヒトPHGPx mRNAに特異的なプライマーを設定し、これを用いてRT-PCR法およびサザンブロツト法を行い、精子PHGPx mRNAを定量的に解析した。精子のミトコンドリア外膜の-S-S-結合の状態は精子運動能と密接に関連していると考えられるので、同一症例の精子の運動能(運動率、直進性ならびに運動速度など)をCASA(computer-aided sperm analyzer)を用いて評価し、さらに精子ミトコンドリアの活動電位をJC-1蛍光染色を用いて測定し、PHGPx mRNAレベルとの関連性を検討した。(2)ヒト精子PHGPx mRNAレベルと精子核成熟度との関連についての検討上記で用いた検体について、精子核の成熟度をacridine orange染色法により染色後、蛍光顕微鏡を用いて観察、評価し、これらの精子核の成熟度とPHGPx mRNAレベルとの関連を検討した。これらの検討により、PHGPxが精子の運動能や受精能を知るうえでひとつの評価法となりうることが示され、今後さらなる研究により、基礎的には、PHGPxが精子成熟過程において果たしている生理的役割が解明し得ると同時に、精子の精巣上体での成熟機構についての理解が深まることが期待される。また、臨床的には、最近急増している原因不明の男性不妊症の病態が明らかになるとともに、精子成熟不全に基づく男性不妊に対する新たな治療法の確立が期待されると考えられる。なお、本研究の2年間の研究期間ではいずれもPHGPx mRNAレベルについての検討を主に行ったため、今後の課題として、蛋白レベルについての研究をさらにすすめる必要がある。

(1) ヒ ト sperm PHGPx mRNA レ ベ ル と sperm movement can と の masato even に つ い て の 検 for perfect pregnancy availability の さ れ て い る male, お よ び pregnancy patients with functional の sperm を 検 body と し て, ア フ ィ ニ テ ィ ー カ ラ ム を with い て total RNA を modulation し た. ヒ ト PHGPx mRNA に specific な プ ラ イ マ ー を set し, こ れ を with い て rt-pcr method お よ び サ ザ ン ブ ロ ツ ト line method を い, sperm PHGPx mRNA を quantitative analytical し に た. Sperm の ミ ト コ ン ド リ ア の - S - S - combined with outer membrane の state は sperm movement can と contact に masato even し て い る と exam え ら れ る の で two cases, the same の sperm の exercise can (movement rate, straight into な ら び に speed な ど) を CASA (computer - aided sperm Analyzer) を い て review 価 し, さ ら に sperm ミ ト コ ン ド リ ア の activity potential を 蛍 light dyeing を JC - 1 with い て し, PHGPx mRNA レ ベ ル と の masato even sex を beg し 検 た. (2) ヒ ト sperm PHGPx mRNA レ ベ ル と sperm nuclear maturity と の masato even に つ い て の 検 please remember で with い た 検 body に つ い て, sperm nuclear の maturity を acridine orange staining に よ り after dyeing, micro mirror を 蛍 light 顕 い て 観 examine, review 価 し, こ れ ら の sperm nuclear の maturity と PHGPx mRNAレベ と と た related を検 for た た. Beg に こ れ ら の 検 よ り, PHGPx が の sperm movement can や fertilization can know を る う え で ひ と つ の review 価 method と な り う る こ と が shown さ れ, future さ ら な る research に よ り, basic に は, PHGPx が sperm maturation process に お い て fruit た し て い る physical battle cut が interpret し must る と に at the same time, sperm の 巣 upper で の mature organization Youdaoplaceholder0, に て, て, て, understand が, deep まる, とが, expect される. ま た, clinical に は, recently raised し て い る unexplained の men don't stretch marks disease の pathological が Ming ら か に な る と と も に, sperm maturation is not complete に づ く men don't stretch marks に す seaborne る new た な therapy の establish が expect さ れ る と exam え ら れ る. な お の study period, this study の 2 years で は い ず れ も PHGPx mRNA レ ベ ル に つ い て の beg を 検 main line に っ た た め, future の subject と し て, protein レ ベ ル に つ い て の research を さ ら に す す め る necessary が あ る.

项目成果

Kaoruko Mizuno, et al.: "Analysis of the Phospholipid Hydroperoxide Glutathione Peroxidase mRNA in the Rat Spermatozoon and Effect of Selenium Deficiency on the mRNA"Biological Trace Element Research. 74(1). 71-79 (2000)

Kaoruko Mizuno等人：“大鼠精子中磷脂氢过氧化物谷胱甘肽过氧化物酶mRNA的分析以及缺硒对mRNA的影响”生物微量元素研究。

小川恵吾, 笠井 剛, 水野薫子, 他: "精子受精能の評価に有用な運動精子性状のCASAを用いての検討"産婦人科の実際. 50. 875-880 (2001)

Keigo Okawa、Tsuyoshi Kasai、Kaoruko Mizuno 等人：“使用 CASA 检查可用于评估精子受精能力的活动精子特性”妇产科实践 50. 875-880 (2001)。

水野薫子,平田修司,星和彦 他: "配偶子の成熟と受精に与える微量元素の影響-精子PHGPx mRNAの検討を中心に-。"日本微量元素学会誌(Biomedical Research on Trace Elements). 10(1). 19-23 (1999)

Kaoruko Mizuno、Shuji Hirata、Kazuhiko Hoshi 等人：“微量元素对配子成熟和受精的影响 - 关注精子 PHGPx mRNA 的研究。”日本微量元素学会杂志（微量元素生物医学研究）10。 (1). 19-23 (1999)。

笠井 剛, 星 和彦, 平田修司, 小川恵吾, 水野薫子, 他: "機能性不妊症・病態とその対策-精子機能異常と機能性不妊-"産婦人科の世界. 52. 499-507 (2000)

Tsuyoshi Kasai、Kazuhiko Hoshi、Shuji Hirata、Keigo Okawa、Kaoruko Mizuno等人：“功能性不孕症、病理学及其对策-精子功能异常和功能性不孕症-”妇产科世界52. 499-507(2000)。

水野薫子, 星 和彦: "ART選択へのアプローチ"産婦人科の実際. 51. 215-220 (2002)

Kaoruko Mizuno、Kazuhiko Hoshi：“ART 选择方法”妇产科实践 51. 215-220 (2002)。