子宮頸部悪性腺腫の遺伝子診断

宫颈恶性腺瘤的基因诊断

• 批准号: 12770912
• 负责人: 倉垣 千恵
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12770912/
• 关键词: 悪性腺腫; STKnll; LKBl; Peuts-Jeghers syndrome; STK11; adenoma malignum; laser capture microdissection; p53; k-ras

子宮頚部悪性腺腫と診断され治療された症例のパラフィン包埋病理標本よりDNAの抽出が可能であった23症例と子宮頚部の腺癌・扁平上皮癌・良性頚管腺病変のDNAを用いて、これら子宮頚部におけるSTK11遺伝子のExon1-9における遺伝子変異を検索した。多施設より収集された23症例については病理組織診断を再検討し、腺癌・悪性腺腫(高・低悪性度)・胃底腺化生に分類した。病理標本からは実体顕微鏡もしくはLaser capture microdissectionを用いて腺病変部分のみを採取してDNAを抽出した。PCR-SSPC法にてスクリーニングし、変異バンドを検出した症例から変異遺伝子のクローニングを行い、悪性腺腫では7つの変異遺伝子が同定された。他の組織型では腺癌に分類されたPeutz-Jeghers症候群の1例に遺伝子変異を同定した。良性と考えられた胃底腺化生や頚管深部のnabothian cystには遺伝子変異は検出されなかった。変異を同定した症例の正常組織部分からもDNAを抽出し、Peutz-Jeghers症候群の1例ではgermline mutation,悪性腺腫ではsomatic mutationであることを確認した。いずれの検体もDNAの抽出から最低2回再検し、再現性のあることを確認した。変異はexon1・4・5およびintron7-exon8の境界にあり、7個中4つの変異がexon1に見出された。変異はPeutz-Jeghers症候群の症例も含めていずれもmissense mutationであり、Peutz-Jeghers症候群において多く報告されているnonsennse mutationはみられなかった。悪性腺腫の高悪性度4例中3例、低悪性度7例中3例に変異があったのに対し、粘液性腺癌19例(Peutz-Jeghers症候群のぞく)では1例の遺伝子変異症例を見るのみであり、有意に(p=0.0045、Fisher's test)組織型との関連があることが示された。悪性腺腫11例中変異を有す6症例と変異のない5症例の予後を追跡比較したところ、臨床病期には2群の差が無いにもかかわらず、変異群では6例中4例が2年以内に死亡したのに対し、変異の無い群では5例とも2年半以上生存していた(p=0.038,Logrank test)。なお、STK11遺伝子の存在する19番染色体短腕(19p13.3)におけるマイクロサテライトマーカーを用いた検索およびAndrogen receptorを用いたクロナリテイー解析については、悪性腺腫に関してパラフィン包埋切片から採取されうるDNA量に限りがあるため、再現性に乏しく判定は困難であり、診断法としてはSTK11遺伝子変異の検索が優った。

The diagnosis and treatment of uterine adenomas include: 23 cases of uterine adenocarcinoma, squamous cell carcinoma, benign ductal adenopathy, STK11 gene, Exon1-9, and DNA extraction. Multiple settings were used to collect 23 cases, including re-examination of pathological diagnosis, adenocarcinoma, adenocarcinoma (high and low grade), and fundal gland metaplasia. Pathology: Laser capture microdissection PCR-SSPC method is used to determine the number of different genes in different cases. A case of Peutz-Jeghers syndrome was classified as adenocarcinoma by histological type. Benign gastric gland metaplasia deep in the gastric canal DNA was extracted from the normal tissue of the patients, and 1 case of Peutz-Jeghers syndrome was confirmed as a somatic mutation. A minimum of 2 cycles of DNA extraction and reproducibility were confirmed. Exon1·4·5 intron7-exon8 1 Peutz-Jeghers syndrome is characterized by multiple reports of missense mutation. 3 of 4 cases with high sex, 3 of 7 cases with low sex, 19 cases with mucinous adenocarcinoma (Peutz-Jeghers syndrome) and 1 case with high sex (P=0.0045, Fisher's test). Among the 11 cases of gonadal edema, 6 cases were different, 5 cases were different, and the follow-up comparison was made. Among the 2 groups, 4 cases died within 2 years, 5 cases survived for more than 2 and a half years (p=0.038,Logrank test). The presence of STK11 gene in chromosome 19 short arm (19p13.3) is difficult to determine, and diagnostic methods are excellent for detecting STK11 gene variation.