リン脂質過酸化物によるラット胎児脳培細胞に対する老化要因の追求

使用过氧化磷脂追踪培养的大鼠胎儿脑细胞中的衰老因素

• 批准号: 12780099
• 负责人: 川上 美佐子
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Mukogawa Women's University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12780099/
• 关键词: リン脂質過酸化物; ラット胎児脳細胞; PC-12細胞; チューブリン; 細胞骨格

本研究の目的は、リン脂質酸化物(LPO)の細胞老化への影響をラット胎児脳細胞を用いて検討することである。ここでは老化は、細胞骨格機能の低下に伴い起こると考えている。本研究者は前年度までに、調製したLPOの同定を行い、細胞骨格タンパク質への影響を検討した。I.培養細胞の選択培養細胞としては、PC12細胞を用いた。PC12細胞は、神経成長因子(NGF)の存在で、微小管より形成される突起を伸長させる。LPOによる微小管への影響が直接観察できる。II.培養細胞(PC12)へのLPOの及ぼす影響LPOは、PC12細胞に対して濃度依存的に細胞毒性を示すことが改良MTT法より、また濃度依存的に膜損傷を起こすことがLDH活性測定結果より、示された。III.LPOの細胞膜に及ぼす影響リン脂質画分の分析では、ヒドロペルオキシドの存在が確認された。また、細胞膜由来脂質に過酸化が進んでいることが、HPLC分析およびマススペクトル分析により確認された。IV.細胞の形態に及ぼすLPOの影響位相差顕微鏡法より、LPOは細胞間ネットワークを崩壊させ、新たな神経突起の形成も阻害することが認められた。また、チューブリン抗体染色蛍光顕微鏡観察では、LPOによって形態変化が起っていたことが認められた。以上のことにより、脳内においてLPOは、微小管に作用し、神経突起形成を阻害し、次に細胞骨格を劣化させ細胞体が障害され、ニューロン全体を損傷させることが示唆された。

は の purpose, this study リ ン lipid acidification content (LPO) の cell aging へ の influence を ラ ッ ト tire where 脳 cells を using い て beg す 検 る こ と で あ る. The aging of で で and the decline of cellular bone function <s:1> are accompanied by に, which leads to <s:1> ると examination えて る る. This researcher discussed the effects of までに in the previous year, modulated た たLPO <s:1> and を in the previous year を検, and the effects of タ タ パ パ and へ of <s:1> quality へ を検 and を検 on the た of cellular bone cells. I. For culturing cells, choose 択. For culturing cells, と て て て. For PC12 cells, を use た た. PC12 cells で, neurotrophic growth factor (NGF) <s:1> exist で, and microtubules よ form される protrusions を elongate させる. LPOによる microtubule へ <s:1> affects が direct 観 observation で る る る. II. The cultured cells (PC12) へ の LPO の and ぼ す influence LPO は, PC12 cells に し seaborne て concentration dependent に cytotoxicity を shown す こ と が improved determined by MTT method よ り, ま た concentration dependent に membrane damage を up こ す こ と が LDH activity determination results よ り, さ れ た. III.LPO <s:1> cell membrane に and ぼす influence on リ <s:1> lipid dissection <s:1> analysis で が, ヒドロペ キシド キシド キシド キシド キシド が が が が が が confirm された. ま た origin, cell membrane lipid に が acidification passes into ん で い る こ と が, HPLC analysis お よ び マ ス ス ペ ク ト ル analysis に よ り confirm さ れ た. IV. の cells morphological に and ぼ す LPO の affect a differ 顕 micro mirror method よ り, LPO は intercellular ネ ッ ト ワ ー ク を collapse 壊 さ せ, new た な god 経 protuberant の form も resistance against す る こ と が recognize め ら れ た. ま た, チ ュ ー ブ リ ン antibody staining 蛍 light 顕 micromirror 観 examine で は, LPO に よ っ て morphology variations が up っ て い た こ と が recognize め ら れ た. Above の こ と に よ り, 脳 に お い て LPO は, tiny に し, god 経 tube forming を resistance against し, degradation time に cells bone を さ せ cell body が handicap of さ れ, ニ ュ ー ロ ン all を damage さ せ る こ と が in stopping さ れ た.

项目成果

土井裕司, 川上美佐子: "リン脂質過酸化物によるチュープリンの劣化機構"バイオサイエンス研究所年報. 第4巻. 19-30 (2000)

Yuji Doi，Misako Kawakami：“磷脂过氧化物的降解机制”生物科学研究所年度报告第 4 卷 19-30 (2000)。

吉田周美, 川上美佐子, 川口真規子, 土井裕司: "リン脂質過酸化物のPC12細胞への影響"日本農芸化学会誌. 115 (2002)

Shumi Yoshida、Misako Kawakami、Makiko Kawaguchi、Yuji Doi：“磷脂过氧化物对 PC12 细胞的影响”日本农业化学学会杂志 115 (2002)。

Misako Kawakami, Syumi Yoshida, Hiroshi Doi: "EFFECTS OF PHOSPHATIDYLCHOLINE HYDROPEROXIDES ON CYTOSKELETON COMPONENT AND CELL GROWTH"17^<th> International Congress of Nutrition. 328 (2001)

Misako Kawakami、Syumi Yoshida、Hiroshi Doi：“磷脂酰胆碱氢过氧化物对细胞骨架成分和细胞生长的影响”第 17 届国际营养大会。