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オンチップマイクロキャピラリーを用いた電気泳動単一分子カウンティング

使用片上微毛细管进行电泳单分子计数

基本信息

批准号：
12875068
负责人：
服部励治
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2002
项目状态：
已结题

项目摘要

今年度は石英基板マイクロキャピラリーの作製、及び全反射顕微鏡による一分子電気泳動の観測を行い以下の知見を得た。1)石英基板マイクロキャピラリーによるDNA解析前年度作製したオンチップマイクロキャピラリーの深さを1マイクロメートル以下になるように抑え,試料が上面カバーガラス近傍に絶えず存在するような構造にした.キャピラリーは感光性ガラスを去年度まで使用していたが、この基板は高アスペクト比のキャピラリー構造を作成するのには適しているが今回のような1マイクロメートルと平らなキャピラリー構造には石英ガラスをドライエッチングするプロセスが適していることがわかった。2)全反射顕微鏡による一分子電気泳動前述の石英基板を用いたマイクロキャピラリーを用い、上部カバーガラス上に全反射顕微鏡の対物レンズをセットした。まずフルオロセイン蛍光分子をバッファー溶液に極微量(10^<-8>M以下)溶かした試料を測定したが、残念ながらブラウン運動により明確な一分子観測をし得た事を示すには至らなかった。続いてブラウン運動の少ないDNAラダーの長鎖分子を測定し、非常に雑音が多いが一分子観測を示しているらしきデータを得るに至ったが、明確な一分子観測のデータとして取り扱うにはさらにもう少し測定感度を上げたセットアップが必要である。

This year, the following observations were made on the fabrication of quartz substrates and the measurement of molecular electromobility using total reflection micromirrors. 1)The quartz substrate is prepared before DNA analysis, and the sample is prepared in the vicinity of the upper surface. In the past, the substrate was used to make the structure of the substrate with high sensitivity. 2)A molecular electrophoresis of the total reflection micromirrors is performed on the quartz substrate. The amount of dissolved light molecules (10^<-8>M or less) in the sample is determined by the amount of residual light molecules in the sample. The long chain of DNA molecules in the middle of the movement is determined. The long chain of DNA molecules in the middle of the movement is determined. The long chain of DNA molecules in the middle of the movement is determined.