横隔膜ヘルニアラットモデルにおける肺低形成と神経支配からみた発生機序

从肺发育不全和神经支配角度观察膈疝大鼠模型的发育机制

• 批准号: 12877282
• 负责人: 須貝 道博
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Hirosaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12877282/
• 关键词: 横隔膜ヘルニア; nitrofen; 肺低形成; 神経支配

先天性横隔膜ヘルニアラット(以下CDHラット)誘発実験モデルを用いて肺低形成の発生機序を実証すべく神経病理学的検討を加えた。SDラットを用い、誘発実験モデルを作製した。膣栓を確認できた時を妊娠0日とし、妊娠9.5日目に100mgのnitrofenをオリーブ油に溶解し、胃内に強制投与した。満期22日でエーテル麻酔下に帝王切開し、胎仔を無呼吸のまま回収した。CDHラットモデルを1)CDHラット誘発モデル、2)非CDHラット誘発モデル、3)妊娠9.5日目にオリーブ油だけを強制投与したものに分類して検討した。約30%に左横隔膜ヘルニア、右横隔膜ヘルニア、5%に両側横隔膜ヘルニアがみられた。3群のラットに対し、肺を摘出し、実体顕微鏡下に10%緩衝ホルマリンにて気管よりInflationし、固定した。主気管支にそった連続切片を作製し、一般染色としてH-E、シュワン細胞同定用にS-100、血管作動性神経同定用にNPY、神経線維同定用にCGRP、BLP、肺の成熟を示すFGF2の各染色を行った。3)の対照群では肺は肺胞管、肺胞腔とも拡張し、隔壁は比較的薄くなっていた。1)のヘルニア形成群では患側肺は肺胞管、肺胞腔とも小さく発育が不良で、壁は立方上皮細胞が密集しており隔壁は厚かった。S-100では肺門部の比較的太い気管支周囲に神経束分布が認められ、1)群でも観察されたが分布は少ない傾向を示した。NPYは3)群でわずかに血管周囲に同定された。興奮性NANC神経であるCGRP、BLPは比較的太い気管支周囲に認められ、1)と3)では3)に多い傾向を示した。1)と3)との有意差判定が必要と考えられた。FGF2は肺門に位置する神経束末端部のシュワン細胞に免疫活性を示したが1)と3)とに有意差は認められなかった。1)と3)の有意差についてはRT-PCR法を用いた定量的評価が必要と考えられた。

Congenital diaphragm (CDH) is an important factor in the development of lung cancer. SD is used to control the flow of electricity. When the plug is confirmed, the nitrofen is dissolved in the oil and the stomach is forced to be administered on the 0th day of pregnancy and the 9.5th day of pregnancy. On the 22nd, the emperor cut open and the fetus did not breathe. 1)CDH induction, 2) non-CDH induction, 3) pregnancy 9.5 days, stress injection, and classification About 30% of the left diaphragm was lost, the right diaphragm was lost, and 5% of the right diaphragm was lost. 3. A 10% buffer is provided under the microscope. The sections of the main vascular branches were prepared, and general staining was performed for H-E, S-100, NPY, CGRP, BLP, and FGF2. 3) The lung cells, lung cavities, and septa are relatively thin. 1) The formation of a cluster of pulmonary cells in the affected lung is poor, and the cuboidal epithelial cells in the lung wall are dense and thick. S-100 is the most common type of lung cancer. NPY 3) is the same as the vascular cycle. The excitatory NANC neurons are more sensitive to CGRP and BLP than to the other two. 1) 3) Intentional difference judgment is necessary. FGF2 has been shown to be active at the end of the bundle of neurons in the lungs. 1) 3) Quantitative evaluation of RT-PCR method is necessary.