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αヘリックスまたはβシートのみの蛋白質大型単結晶の作成とそれらの光学活性の測定

仅由 α 螺旋或 β 折叠组成的大蛋白质单晶的制备及其光学活性的测量

基本信息

批准号：
13874050
负责人：
浅井博
金额：
$ 1.09万
依托单位：
Waseda University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

项目摘要

我々はHAUP法を用いて結晶の光学活性(円二色性、旋光分散)の測定を試みた。用いた結晶は有機金属錯体トリスエチレンジアミンコバルト錯体のヨウ化物単結晶で、溶液中では可視領域にコットン効果最大をもつ物質である。我々はタンパク質単結晶光学活性測定を最終目的としてHAUP法での二色性分散および旋光性分散測定の手法を確立するためにこの物質を用いた。吸収を含めない場合の光学活性のHAUP法での測定は確立されているが、今回我々が試みたのは吸収を含めた場合の光学活性測定であり、その場合のHAUP法における原理式は既に理論的に確立されているが実際の測定はまだなされていなかった。今回用いたコバルト錯体による測定で明らかになったことは、従来の吸収を含めない場合のHAUP法に比べ吸収を含めた場合、系統誤差のパラメータがこれまでの手法では決定することができないということだった。そこで我々は原理式の理論値と測定による実験値を最小二乗法でフィッティングさせる手法を試みた。それにより結晶軸の各方向での二色性分散および旋光性分散を求めることができた。しかし、この波長領域では近似のために用いた条件が成り立たなくなることが判明し、より正確な解析が必要であることがわかった。今回の研究ではタンパク質単結晶のHAUP法での光学活性測定には至らなかったがこれまでコバルト錯体と同様に可視領域にコットン効果最大を有するヘモグロビン単結晶の作成に成功し測定手法確立しだい測定できる状況にある。また、将来的にα-helixによるコットン効果を示す紫外領域用測定試料としてほぼα-helixが一方向に配向しているインターフェロンβの大腸菌発現系を作成し準備した。今後は系統誤差の解析手法を確立し、タンパク質の光学活性測定に応用していく予定である。

The HAUP method was used to determine the optical activity (dichroism, optical rotation dispersion) of the crystal. The results show that the organic metal error body can be used to determine the chemical composition of the wrong metal, and the chemical compound in the solution can be used to determine the maximum temperature in the solution. We use the HAUP method to determine the optical activity of dichroism, optical activity, optical activity, optical activity and optical activity. The optical activity is determined by the HAUP method. This time, the optical activity test is based on the optical activity test. This time, the optical activity test is based on the HAUP method. This time, you can use the wrong system to determine the accuracy of the system. This time, you can use the HAUP method to determine the accuracy and accuracy of the system. We use the principle to determine the accuracy of the test. The least square method is used to determine the accuracy of the test method. The results showed that dichroism dispersion and optical activity dispersion were measured in all directions. In the field of wave length and wave length, the conditions are used to determine the accuracy and correct analysis of the necessary conditions. This time, we have studied the results of the HAUP method to determine the optical activity of the system. In the same field, the results show that the results show that the method is successful. In the future, the results show that in the ultraviolet field, the determination materials are used in the ultraviolet field. The determination materials are used in the ultraviolet field. In the direction of α-helix, the preparation is made in the direction of α-helix. In the future, the system differential analysis method is used to determine the optical activity of the system, and the optical activity of the system is determined by the determination of optical activity.