核酸医薬(NF-κB decoy)を用いた遺伝子放射線治療

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【背景と目的】転写因子NF-κBは、細胞を生存に導くための中心的な因子であると考えられている。本研究はおとり型核酸医薬(NF-κB decoy)を癌細胞に導入することにより、放射線感受性の増感を図るものである。【方法ならびに成績】1)HVJ-Liposome法によるdecoy導入の検討ヒト舌癌細胞SASにおけるHVJ-liposome法によるdecoyの導入効率を明らかにするため、FITCで蛍光ラベルしたNF-κB decoyを導入した。導入24時間後にNF-κB decoyのSAS細胞核への導入を認めた。2)NF-κBのDNA結合能の検討NF-κB decoyによるNF-κBのDNA結合能の抑制を検討するため、Gel shift assayを行った。放射線照射5Gyにて、NF-κBのDNA結合能は増加した。これに対し、NF-κB decoy導入群においては、NF-κBの著明なDNA結合能低下を認めた。3)アポトーシスへの影響の検討NF-κB decoyによるアポトーシス細胞の割合の変化を検討するため、ヘキスト染色にて、放射線2.5Gy・5Gy照射後のアポトーシス細胞の割合を定量化した。NF-κB decoy導入群において、有意なアポトーシス細胞の増加を認めた。4)細胞増殖への影響の検討NF-κB decoyによる細胞増殖への影響を検討するため、放射線2.5Gy・5Gy照射から72時間後の細胞数の変化を検討した。NF-κB decoy導入群において、有意な細胞増殖の抑制を認めた。【総括】HVJ-liposome法によりNF-κB decoyを効率的に細胞核へ導入し、NF-κBのDNA結合を抑制することを示した。そしてこのDNA結合阻害により、アポトーシス細胞が増加し、放射線感受性の増感が起こることが示唆された。