核酸医薬(NF-κB decoy)を用いた遺伝子放射線治療

使用核酸药物的基因放射治疗（NF-κB诱饵）

• 批准号: 13877139
• 负责人: 田中 英一
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-13877139/
• 关键词: 核酸医薬; NF-κB; decoy; 放射線; 遺伝子治療; HVJ; アポトーシス; 放射線治療; 癌; デコイ; NF-kappaB; 転写因子

【背景と目的】転写因子NF-κBは、細胞を生存に導くための中心的な因子であると考えられている。本研究はおとり型核酸医薬(NF-κB decoy)を癌細胞に導入することにより、放射線感受性の増感を図るものである。【方法ならびに成績】1)HVJ-Liposome法によるdecoy導入の検討ヒト舌癌細胞SASにおけるHVJ-liposome法によるdecoyの導入効率を明らかにするため、FITCで蛍光ラベルしたNF-κB decoyを導入した。導入24時間後にNF-κB decoyのSAS細胞核への導入を認めた。2)NF-κBのDNA結合能の検討NF-κB decoyによるNF-κBのDNA結合能の抑制を検討するため、Gel shift assayを行った。放射線照射5Gyにて、NF-κBのDNA結合能は増加した。これに対し、NF-κB decoy導入群においては、NF-κBの著明なDNA結合能低下を認めた。3)アポトーシスへの影響の検討NF-κB decoyによるアポトーシス細胞の割合の変化を検討するため、ヘキスト染色にて、放射線2.5Gy・5Gy照射後のアポトーシス細胞の割合を定量化した。NF-κB decoy導入群において、有意なアポトーシス細胞の増加を認めた。4)細胞増殖への影響の検討NF-κB decoyによる細胞増殖への影響を検討するため、放射線2.5Gy・5Gy照射から72時間後の細胞数の変化を検討した。NF-κB decoy導入群において、有意な細胞増殖の抑制を認めた。【総括】HVJ-liposome法によりNF-κB decoyを効率的に細胞核へ導入し、NF-κBのDNA結合を抑制することを示した。そしてこのDNA結合阻害により、アポトーシス細胞が増加し、放射線感受性の増感が起こることが示唆された。

Planning background と purpose 】 【 write factor nf-kappa B は, cell に を survival guide く た め の center な factor で あ る と exam え ら れ て い る. This study は お と り type d 薬 nucleic acids (nf-kappa B named decoy) を cancer に import す る こ と に よ り, radiation susceptibility の rights sense を 図 る も の で あ る. 【 method な ら び に grades 】 1) HVJ - Liposome に よ る named decoy import の beg ヒ 検 ト tongue cancer cells SAS に お け る HVJ Liposome method に よ る named decoy の import working rate を Ming ら か に す る た め, FITC で 蛍 light ラ ベ ル し た nf-kappa B named decoy を import し た. After 24 hours of introduction, にNF-κB decoy <s:1> SAS nucleus へ <s:1> introduction を recognition めた. 2)NF-κB <s:1> DNA binding energy <s:1> 検 NF-κB decoyによるNF-κB <s:1> DNA binding energy <s:1> inhibit を検 するため Gel shift assayを った. Radiation exposure of 5Gyにて, the binding energy of NF-κB <s:1> DNA にて increases by た た. <s:1> れに has a low DNA binding energy for めた, NF-κB decoy introduction group にお て て, and NF-κB <s:1> clear な を recognition めた. 3) ア ポ ト ー シ ス へ の influence の beg the nf-kappa B named decoy 検 に よ る ア ポ ト ー シ の cut close の ス cells - the を beg す 検 る た め, ヘ キ ス ト dyeing に て after 2.5 Gy · 5 Gy, radiation exposure の ア ポ ト ー シ ス cells の cut close を quantitative し た. NF-κB decoy introduction population にお にお て, intentional なアポト シス シス cells <s:1> increase を recognition めた. 4) cells raised colonization へ の influence の beg the nf-kappa B named decoy 検 に よ る cells raised colonization へ の influence を beg す 検 る た め 2.5 Gy · 5 Gy, radiation exposure か ら の の cell population after 72 time variations change を beg し 検 た. NF-κB decoy introduction group にお にお て, intentional な cell proliferation <s:1> inhibition を recognition めた. HVJ 総 enclose 】 【 liposome method に よ り nf-kappa B named decoy を に nuclei へ import し working rate, the nf-kappa B の dna-binding を inhibit す る こ と を shown し た. そ し て こ の dna-binding resistance against に よ り, ア ポ ト ー シ ス cells が raised し, radiation susceptibility の rights sense が up こ る こ と が in stopping さ れ た.