内軟骨性骨化における軟骨吸収のメカニズムの解明:破軟骨細胞についての研究

阐明软骨内骨化过程中软骨吸收的机制：破软骨细胞的研究

• 批准号: 13877236
• 负责人: 荻野 利彦
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Yamagata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-13877236/
• 关键词: matrrx metalloproteinase-9 (MMP-9); tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP); apoptosis; cartilage; ossification; matrix metalloproteinase-9(MMP-9); tartrate-resistant acid phosphatase(TRAP)

内軟骨性骨化における軟骨吸収と血管侵入に関与する細胞の特徴を明らかにすることを目的とした。野性型マウスを用い、胎仔期の一次骨化(胎齢14日から16日の大腿骨)、生後の二次骨化(大腿骨遠位骨端)、成長帯での内軟骨性骨化(大腿骨遠位骨端軟骨板)、および骨折治癒における内軟骨性骨化を組織学的に分析した。1)サフラニンO染色、2)TRAP染色、および3)in situ hybridization (MMPs-9)を施行した。1)サフラニンO染色をみると、胎齢14日では軟骨内に血管や細胞の侵入はみられなかった。胎齢15日には軟骨原基中央に血管と細胞の侵入がみられた。2)TRAPの活性をみると、胎齢15日では、軟骨内に侵入した細胞の一部にTRAP活性を認めた。3)MMP-9の発現をみると、軟骨内に侵入した細胞の多くにMMP-9の発現を認めた。MMP-9陽性細胞は軟骨吸収面(骨・軟骨境界部)に存在した。4)TUNELでは、軟骨内にはTUNEL陽性の軟骨細胞はなく、骨髄腔内に陽性細胞が散在していた。一次骨化においてもMMP-9が軟骨吸収と血管侵入に重要な役割を演じていることが示唆された。MMP-9陽性細胞はTRAP陽性細胞に先んじて軟骨内に侵入していた。MMP-9が一次骨化での軟骨吸収に関与する細胞の早期のマーカーであると考える。また、MMP-9陽性細胞の侵入前にはTUNEL陽性細胞はなく、骨髄腔にTUNEL陽性細胞がみられたことから、MMP-9による軟骨吸収が軟骨細胞のアポトーシスを制御していると考えた。

Within cartilaginous ossification に お け る cartilage suction 収 と vascular invasion に masato and す の る cells, 徴 を Ming ら か に す る こ と を purpose と し た. Wild type マ ウ ス を い, tire larvae stage の a ossification (tire 齢 14 か ら 16 の thighbone), raw の after secondary ossification (femur far extremities), growth 帯 で の within cartilaginous ossification (femur epiphyseal cartilage plate) far, お よ び fracture cure に お け る within cartilaginous ossification を histologic analysis of に し た. 1)サフラニ を O staining, 2)TRAP staining, および3)in situ hybridization (MMPs-9)を performed た. Youdaoplaceholder0 <s:1> O staining をみると, 齢14 days of pregnancy で みられな intramedular に vascular や cell mass invasion みられな みられな った った. On the 齢 15th day of gestation, に と chondrogenic central に vascular と cells invade がみられた. 2)TRAP <s:1> activity をみると, fetal 齢15 days で, intrachondral に invasion of <s:1> た cells <s:1> a part にTRAP activity を is found to be めた. 3) The occurrence of MMP-9 cells is をみると, the invasion of に into the cartilage is excessive くに, and the occurrence of MMP-9 cells is を recognition めた. In MMP-9 positive cells, に cartilage aspiration surface (bone-cartilage boundary)に has a た. 4)TUNELで に, に in the cartilage, tunel-positive <s:1> chondrocytes <s:1> なく, and に positive cells が in the bone marrow cavity are scattered in <s:1> て た た た. A ossification に お い て も MMP - 9 が cartilage suction 収 と vascular invasion に cut を play important な service じ て い る こ と が in stopping さ れ た. MMP-9 positive cells んじて TRAP positive cells に first んじて intramondral に invade <s:1> て た た た. The relationship between MMP-9が primary ossification で <s:1> cartilage aspiration に and する cell <s:1> early <s:1> カ カ であると であると える. ま の た, MMP - 9 positive cells extend into the former に は TUNEL positive cells は な く, bone marrow cavity に TUNEL positive cells が み ら れ た こ と か ら, MMP - 9 に よ る cartilage suction 収 が chondrocytes の ア ポ ト ー シ ス を suppression し て い る と exam え た.