ヒト免疫不全ウイルス(HIV)I型Vprを用いた前立腺癌遺伝子治療

使用人类免疫缺陷病毒 (HIV) I 型 Vpr 进行前列腺癌基因治疗

• 批准号: 13877268
• 负责人: 大西 智一郎
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-13877268/
• 关键词: 前立腺癌; HIV-1; Vpr; アポトーシス; 遺伝子治療; シュードウイルス; アクセサリー遺伝子

われわれは、まずヒトT細胞白血病由来のJurkat細胞に高い効率で感染可能なVprシュードウイルスの感染系を樹立した。この感染系はHIVのエンベロープをVSV-Gのエンベロープに置き換えたもので、従来のHIVの約100倍の感染価を持つことが可能であった。さらにgreen fluorescent protein(GFP)を挿入することにより、その発現から感染細胞を容易に見分けることも可能であった。VprシュードウイルスはJurkat細胞に感染後24時間で、G2 arrestを誘導し、その作用は感染後48時間後も持続した。annexin-Vによるアポトーシスの検討でVprを有するウイルス感染細胞ではVpr欠損ウイルス感染細胞と比較して感染後24時間で2倍、48時間で2.5倍、アポトーシスを誘導した。今回、2種類の前立腺癌細胞株PC-3およびLNCapに、感染の多重度(m.o.i)3でこのHIV-1 Vprシュードウイルスを感染させた結果、GFP発現効率から、シュードウイルス導入効率はそれぞれ14.3%±5.8%、9.5%±3.2%であった。アポトーシス誘導率はそれぞれ13.3%±2.8%、7.5%±1.2%であった。今回の結果より、HIV-1 Vprシュードウイルスは前立腺癌細胞株への遺伝子導入が可能であり、更には、アポトーシスを誘導することから遺伝子治療への応用が可能であることが示唆された。さらに今回使用したHIV-1 Vprシュードウイルスは、HIVのエンベロープをVSV-Gのエンベロープに置き換えることで、CD4非依存的な感染が可能となり、多くの細胞に利用できることが示唆された。今後、ウイルスの発症に必須であるgag遺伝子を除くことでさらに安全性の高いベクターに改良することが可能であり、新しい遺伝子治療の手段になり得ると思われる。

The high infection rate of Jurkat cells from which T-cell leukemia originated was established. This infection system is about 100 times more likely to cause HIV infection. Green fluorescent protein(GFP) can be easily detected in infected cells. Vpr cells were induced 24 hours after infection, G2 arrest was induced, and the effect was maintained 48 hours after infection. Vpr was induced in infected cells 24 times, 2.5 times and 48 times after infection. In the present study, two types of advanced adenocarcinoma cell lines PC-3 and LNCap were infected with HIV-1 Vpr and its infection rate was 14.3%±5.8% and 9.5%±3.2% respectively. The conductivity of the sample was 13.3%±2.8% and 7.5%±1.2%. This year's results show that it is possible to introduce HIV-1 Vpr into prostate cancer cell lines, and it is also possible to induce apoptosis. This demonstrates that it is possible to use HIV-1 Vpr in gene therapy. Today, HIV-1 Vpr is used to detect HIV infection, and CD4-independent infection is possible due to HIV infection. In the future, it is necessary to improve the safety of the virus, and it is possible to improve the treatment of the virus.