静脈を動脈化する手法の開発とその臨床への応用

静脉动脉化方法的研制及其临床应用

• 批准号: 15659181
• 负责人: 前村 浩二
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15659181/
• 关键词: 動脈; 静脈; 冠動脈バイパス; 転写因子; 血管内皮; マイクロアレイ

静脈は従来バイパスグラフとしてよく用いられるが、長期にわたる開存が期待できない。これは動脈系と静脈系の血管の性質の相違によるものと考えらる。本研究は、静脈系と動脈系の内皮細胞の分化調節メカニズムの相違を分子レベルで明らかにし、それに基づいて、自己の静脈を動脈に変換する手法を開発することを目的とする。我々は最近、動脈と静脈の分化のkey regulatorと考えられる転写因子Cardiac hairy like factor(CHF)をクローニングした。ゼブラフィッシュではangioblastはdefaultとしては静脈に分化するが、Notchシグナルの存在下では、その下流のCHFのhomologが活性化され、静脈に分化するための遺伝子発現を抑制することにより動脈への分化を促進することが明らかになっている。そこでまずCHFを発現するアデノウイルスを作成し、このアデノウイルスをヒト臍帯静脈内皮細胞に感染させるとEphB4の発現は微増したが、動脈の表現型を示すまでには至らず、ほ乳類では他の因子も静脈の動脈化に重要であると考えられた。次にNotchシグナルの血管内皮での調節機序について検討した。その結果Notch1と4、Delta4、Jagged1が血管内皮で発現していた。Delta4は静脈系の血管内皮ではVEGFにより発現が上昇したが、動脈系の内皮細胞ではVEGFにより発現の変化はなかった。その発現調節メカニズムをさらに検討するためにヒトDelta4遺伝子の5'隣接領域7kbをクローニングしルシフェラーゼ遺伝子に結合したレポーターを作成した。このレポーターはヒト臍帯静脈内皮細胞ではVEGFにより活性が上昇したが、大動脈内皮細胞では上昇しなかった。現在VEGFへの反応性に重要なエレメントを同定中である。この部位に結合するタンパクを同定することにより、静脈の動脈化に重要な物質が明らかにできると期待できる。マウス胎児のpara-aortic splanchnopleural mesoderm(P-Sp)領域の器官培養は、in vitroにおいて中胚葉細胞の血管内皮細胞への分化を観察できる良い培養系である。現在このP-Sp培養系を用いて、血管内皮細胞がどのようにして、動脈系、静脈系に分化して行くのかを、Ephrin-B2、EphB4をマーカーとして解析中である。これらの実験で同定された因子を用いて静脈の動脈化に応用する予定である。

Venous は 従 to バ イ パ ス グ ラ フ と し て よ く with い ら れ る が, long-term に わ た る open deposit が expect で き な い. <s:1> れ the arterial system と the venous system <s:1> the nature <e:1> of the blood vessels is contrary による <s:1> と と to test えらる. This study は, vein と artery の の endothelial cells differentiated regulation メ カ ニ ズ ム の conceives を molecular レ ベ ル で Ming ら か に し, そ れ に base づ い て, oneself の vein に を artery variations in す る gimmick を open 発 す る こ と を purpose と す る. I 々 は と recently, artery vein の differentiation の key regulator と exam え ら れ る planning write factor Cardiac hairy like factor (CHF) を ク ロ ー ニ ン グ し た. ゼ ブ ラ フ ィ ッ シ ュ で は angioblast は default と し て に は vein differentiation す る が, Notch シ グ ナ ル の presence で は, そ の obscene の CHF の homolog が activeness さ に れ, vein differentiation す る た め の posthumous son 伝 発 now を inhibit す る こ と に よ り artery へ の を promote differentiation す る こ と が Ming Youdaoplaceholder0 になって になって る る. そ こ で ま ず CHF を 発 now す る ア デ ノ ウ イ ル ス を し, consummate こ の ア デ ノ ウ イ ル ス を ヒ ト umbilical 帯 に venous endothelial cells infected with さ せ る と EphB4 の 発 は now slightly raised し た が, arteries の phenotype を shown す ま で に は to ら ず, ほ milk で は he の factor の も vein was arterialized に important で あ る と exam え ら れ た. The にNotchシグナ シグナ <s:1> vascular endothelium で <s:1> regulatory sequence に て検 て検 て検 discuss <s:1> た. Youdaoplaceholder0 そ results Notch1と4, Delta4, Jagged1が vascular endothelium で present て て た た. Is の Delta4 は vein endothelial で は VEGF に よ り 発 now rising が し た が, arterial endothelial cells is の で は VEGF に よ り 発 の now - the は な か っ た. そ の 発 now adjust メ カ ニ ズ ム を さ ら に beg す 検 る た め に ヒ ト Delta4 posthumous son 伝 の 5 '7 KB を 隣 meet field ク ロ ー ニ ン グ し ル シ フ ェ ラ ー ゼ posthumous son 伝 に combining し た レ ポ ー タ ー を made し た. こ の レ ポ ー タ ー は ヒ ト umbilical 帯 venous endothelial cells で は VEGF に よ り active が rise し た が, artery endothelial cells で は rise し な か っ た. Now VEGFへ <s:1> anti応 に is important なエレメ なエレメ トを トを in である. こ に の parts combine す る タ ン パ ク を with fixed す る こ と に よ の り, vein was arterialized に な important material が Ming ら か に で き る と expect で き る. マ ウ ス tire where の para - aortic splanchnopleural mesoderm の organs (P - Sp) field cultivation は, the in vitro に お い て mesoderm cells の endothelial cells へ の differentiation を 観 examine で き い る good training department で あ る. Now こ の P - Sp training department を with い て, vascular endothelial cells が ど の よ う に し て, arteries and veins に differentiation し て line く の か を, Ephrin - B2, EphB4 を マ ー カ ー と し て in parsing で あ る. The <s:1> experiment で is used to determine the された factor を by <s:1> て venous arterialization に応 by する to determine である.

项目成果

Kruppel-like transcription factor KLF5 is a key regulator of adipocyte differentiation

• DOI: 10.1016/j.cmet.2004.11.005
• 发表时间: 2005-01-01
• 期刊: CELL METABOLISM
• 影响因子: 29
• 作者: Oishi, Y;Manabe, I;Nagai, R
• 通讯作者: Nagai, R

Kawamoto T, et al.: "A novel autofeedback loop of Dec1 transcription involved in circadian rhythm regulation."Biochem Biophys Res Commun.. 313. 117-124 (2004)

Kawamoto T 等人：“参与昼夜节律调节的 Dec1 转录的新型自动反馈环路。”Biochem Biophys Res Commun.. 313. 117-124 (2004)

Vasorin, a transforming growth factor beta-binding protein expressed in vascular smooth muscle cells, modulates the arterial response to injury in vivo

Vasorin 是一种在血管平滑肌细胞中表达的转化生长因子 β 结合蛋白，可调节动脉对体内损伤的反应

• 发表时间: 2004
• 期刊: Proc Natl Acad Sci U S A 101
• 作者: Ikeda Y;et al.
• 通讯作者: et al.

The PAI-1 gene as a direct target of endothelial PAS domain protein-1 in adenocarcinoma A549 cells.

PAI-1 基因作为腺癌 A549 细胞中内皮 PAS 结构域蛋白 1 的直接靶标。

• 发表时间: 2004
• 期刊: American Journal of Respiratory Cellular and Molecular Biology 31・3
• 作者: Sato M;et al.
• 通讯作者: et al.

Endothelial PAS domain protein 1 gene promotes angiogenesis through the transactivation of both vascular endothelial growth factor and its receptor, Flt-1

• DOI: 10.1161/01.res.0000134920.10128.b4
• 发表时间: 2004-07-23
• 期刊: CIRCULATION RESEARCH
• 影响因子: 20.1
• 作者: Takeda, N;Maemura, K;Nagai, R
• 通讯作者: Nagai, R