高速in situハイブリダイゼーション法を用いた腎発生再生に関わる遺伝子の探索

利用高速原位杂交寻找参与肾脏发育和再生的基因

• 批准号: 15659205
• 负责人: 門川 俊明
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15659205/
• 关键词: 腎臓; 発生; 再生; 後腎; 高速in situ hybridization法

高速in situ hybridization法は、組織を96穴プレートに固定し、in situ hybridization法のすべての過程を96穴プレートで行い、週当たり1000遺伝子程度のin situ hybridization解析をおこなう方法である。本研究課題ではマイクロアレイ法、ディファレンシャルディスプレイ法、サブトラクティブハイブリダイゼーション法などのスクリーニング法と高速in situ hybridization法を組み合わせた効率的なスクリーニング方法の開発をおこなった。後腎(胎生期腎臓)の凝集間葉細胞は腎臓の前駆細胞と考えられ、同細胞に特異的に発現している遺伝子は腎臓の発生再生に関わる遺伝子である可能性が高いと考えられる。同細胞に特異的に発現している遺伝子を効率よくスクリーニングするために高速in situ hybridization法を用いた。まず、胎生18日目のラット後腎のmRNAと成体マウス腎臓のmRNAとでサブトラクティブハイブリダイゼーション法をおこない、後腎特異的サブトラクションライブラリーを作製した。このライブラリーよりランダムにセレクトしたクローンをプローブとし、後腎に対して高速in situ hybridizationを行なった。高速in situ hybridization法は染色の感度などには改善の余地があるものの、スクリーニング方法として十分使える方法であることがわかった。本研究より、凝集間葉細胞に特異的に発現する遺伝子は同定できなかったものの、興味深い発現パターンを示す複数の遺伝子が同定でき、今後、これらの遺伝子について解析を進めていく予定である。

High-speed in situ hybridization method, tissue tissue test, tissue test, in situ hybridization method and in situ hybridization analysis were used to determine the accuracy of the method. The purpose of this study is to determine the accuracy of the high-speed in situ hybridization method, which is based on the combination of high-speed in situ hybridization method. In the later stage (fetal period), there is a high probability of birth and rebirth in the cells of the same cell. In the same way, we can use the high-speed in situ hybridization method in the same way. On the 18th day of birth, the baby was born on the 18th day of birth, and the mRNA was born on the 18th day of birth. The baby was born on the 18th day of the birth, and the baby was born on the 18th day of the fetus. I don't know what to do. I don't know. I don't know what to do. I don't know what to do. I don't know what to do. The high-speed in situ hybridization method can improve the sensitivity and improve the sensitivity. In this study, agglutination tests show that the cells are the same as each other, and that the complex number is the same as that of the agglutinator. in the future, the results show that the complex number is the same, and in the future, the results are the same.

项目成果

Yoshino J, Monkawa T, Tsuji M, Hayashi M, Saruta T: "Leukemia inhibitory factor is involved in tubular regeneration after experimental acute renal failure"Journal of American Society of Nephrology. 14(12). 3090-3101 (2003)

Yoshino J、Monkawa T、Tsuji M、Hayashi M、Saruta T：“白血病抑制因子参与实验性急性肾衰竭后肾小管再生”美国肾脏病学会杂志。

Spironolactone in combination with cilazapril ameliorates proteinuria and renal interstitial fibrosis in rats with anti-thy-1 irreversible nephritis

• DOI: 10.1291/hypres.27.971
• 发表时间: 2004-12-01
• 期刊: HYPERTENSION RESEARCH
• 影响因子: 5.4
• 作者: Asai, M;Monkawa, T;Saruta, T
• 通讯作者: Saruta, T