ES細胞による歯周組織再生と顎顔面領域発生のメカニズムの解明

阐明ES细胞牙周组织再生和颌面部发育的机制

• 批准号: 22KJ1198
• 负责人: 森田 和機
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2023
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2023-03-08 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22KJ1198/
• 关键词: 歯周組織再生; 歯根膜由来間葉系幹細胞; MSC; ES細胞; iPS細胞; 多能性幹細胞; 神経堤細胞; 発生; 歯根膜細胞; 間葉系幹細胞; 歯周組織再生療法; 顎顔面発生; 次世代シーケンサー

歯周病は本邦における成人の歯の喪失原因でもっとも大きな割合を占めており、歯周病や歯の喪失は全身にも多くの悪影響を与えることが知られている。そこで、従来の方法では治療不可能であった重度歯周炎の新たな治療法として、無限の増殖能を持つヒトES細胞から神経堤細胞(NCC)を経て歯根膜由来間葉系幹細胞(PDL-MSC)を分化誘導する方法を確立し、その臨床応用への可能性を探索する。具体的には、ES細胞より分化誘導したNCCに、LHX8やPAX9などの遺伝子をCRISPR/Cas9システムにより導入し、PDL-MSCへの分化誘導を目指す。さらに、分化の各時系列を次世代シーケンサーにより解析することで分化誘導のキーとなる遺伝子を解明する。その後、ES細胞由来PDL-MSCを免疫不全マウスへ移植し、安全性と有効性を評価する。同様の手法で、歯髄幹細胞もES細胞から分化誘導することが可能であり、ヒトにおける歯の発生過程、延いては、顎口腔の発生機序の解明を目指す。令和3年度は、国立成育医療研究センターよりSEES1~7に加え、臨床グレードとしてストックされているSEES-Xの８株のES細胞の供与を受け、研究実施機関にてワーキングストックの作成を行なった。また、理研BRCと国立医薬基盤・健康・栄養研究所より６０６A3など計４株のiPS細胞を購入し、同様にワーキングストックを作成した。令和4年度は、上記の多能性幹細胞から中間体である神経堤細胞への分化方法を確立・最適化した。また、研究実施期間の保有する４株のPDL-MSCのトランスクリプトーム解析を実施し、リファレンスとなる基礎データを得た。ES細胞からPDL-MSCを分化誘導する方法として、①種々の成長因子の添加、②ES細胞とPDL -MSCの共培養、③低接着培養プレートを用いた３次元培養を実施し、結果を検討した。

The causes of tooth loss in adults with periodontal disease are known to be large and complex, and the effects of tooth loss on the whole body are known to be large and complex. To explore the possibility of clinical application of new therapeutic methods for treating severe periodontitis, establishing methods for differentiation induction of neural stem cells (NCC) and mesenchymal stem cells (PDL-MSC) derived from the root membrane of dentists with unlimited proliferation ability. Specifically, ES cell differentiation induction, NCC, LHX8 and PAX9 gene expression, CRISPR/Cas9 system induction, PDL-MSC differentiation induction are indicated. In addition, the differentiation of the time series of the next generation, the analysis of the differentiation of the next generation, the analysis of the differentiation of the next generation. After transplantation, ES cell-derived PDL-MSC is immune deficient, and its safety is evaluated. In the same way, the differentiation of dental stem cells and ES cells can be induced, and the development of dental processes, delays, and oral life processes can be explained. In 2003, SEES1 - 7 was added to the National Institute of Adult Medical Research, and 8 ES cells from SEES-X were supplied and received in clinical trials. The research institute was established. BRC and the National Institute of Medicine, Health and Nutrition have purchased 4 iPS cells and created the same system. In 2004, the pluripotent stem cells listed above were used as intermediates to establish and optimize the differentiation method of neural cells. During the research period, four PDL-MSC strains were retained, and basic information was obtained. Methods of ES cell differentiation induction: (1) Addition of growth factors;(2) Co-culture of ES cells and PDL-MSC;(3) Low temperature culture;(4) Three-dimensional culture; and (5) Results.

项目成果

東京医科歯科大学歯周病学分野

东京医科齿科大学牙周病科

Low-Level Erbium-Doped Yttrium Aluminum Garnet Laser Irradiation Induced Alteration of Gene Expression in Osteogenic Cells from Rat Calvariae

低水平掺铒钇铝石榴石激光照射诱导大鼠颅骨成骨细胞基因表达的改变

• DOI: 10.1089/photob.2020.4958
• 发表时间: 2021
• 期刊: Photobiomodulation, Photomedicine, and Laser Surgery
• 作者: Shimohira Tsuyoshi;Niimi Hiromi;Ohsugi Yujin;Tsuchiya Yosuke;Morita Kazuki;Yoshida Sumiko;Hatasa Masahiro;Shiba Takahiko;Kadokura Hiroshi;Yokose Satoshi;Katagiri Sayaka;Iwata Takanori;Aoki Akira
• 通讯作者: Aoki Akira

結紮誘導歯周炎モデルマウスを用いたダイオードレーザー照射による歯周炎抑制の影響

二极管激光照射对结扎诱导牙周炎模型小鼠牙周炎的抑制作用

• 发表时间: 2021
• 作者: 大杉勇人;畑佐将宏;下平剛;芝多佳彦;駒津匡二;土谷洋輔;福場駿介;前川祥吾;新見ひろみ;森田和機;片桐さやか;岩田隆紀;青木 章
• 通讯作者: 青木 章