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尿路感染症におけるバクテリオファージ療法の基礎的研究および臨床応用

噬菌体治疗尿路感染的基础研究及临床应用

基本信息

批准号：
15659382
负责人：
西川宏志
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Kochi University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

1.マウス実験的尿路感染症に対するファージ有効投与量、体内動態の検討(1)6-8週齢BALB/c雌マウスの膀胱内に1×10^8から2×10^<10>までの菌量の尿路病原大腸菌ECU5株を接種し、生存率を経時的に検討した。その結果1×10^9から5×10^9までは接種菌量に依存して生存率の低下が認められ、5×10^9以上ではほぼ100%のマウスが1週間以内に死亡した。死亡したマウス臓器には多数の接種菌が確認され、敗血症を生じていると考えられた。以上から、接種菌量を5×10^9に決定した。(2)5×10^9のECU5株をマウス膀胱に接種後、大腸菌ファージT4および筆者らが新たに分離したファージφEを、接種菌量に対する投与ファージ相対量(MOI)が0.01から100で腹腔内に投与した。T4投与の場合MOI=1で生存率が80%、MOI=60以上で100%となった。一方、φEはMOI=60で生存率60-70%となり、いずれのファージでも致死抑制が確認された。(3)ファージT4およびφE(10^<11>)をマウス腹腔内に投与し、経時的に臓器を摘出し、ファージ数の計測を行なった。その結果、接種したファージは速やかに全身に伝播され、24時間は比較的安定に各臓器で保持されることが分かった。2.バイオフィルム感染症に対するファージ療法の有効性確認(1)臨床分離緑膿菌8株を、ポリスチレン(PS)96穴プレート内に0.25%グルコース添加LB培地で37℃24時間培養し、底面にバイオフィルムを形成させた。バイオフィルムに対し緩衝液(対照)あるいは緑膿菌ファージ3株を37℃で作用させ、残存バイオフィルムの定量を行なった。(2)検討した全てのファージで、また全ての緑膿菌株についてバイオフィルムの顕著な減少が認められ、ファージがバイオフィルム内の緑膿菌をも破壊できる可能性が示された。

1. Study on the dosage and in vivo dynamics of urinary tract infection in BALB/c females at 6-8 weeks<10>. The survival rate of 1×10^9 ~ 5 Most of the inoculants were confirmed dead, and blood poisoning occurred. The above is determined by the inoculum size of 5×10^9. (2)5 After inoculation of 10^9 ECU5 strains in bladder, coliform T4 was isolated and the MOI was 0.01 to 100 in abdominal cavity. When T4 is cast and MOI=1, survival rate is 80%, MOI=60 or more, survival rate is 100%. The survival rate is 60-70%. (3)The number of patients who received the treatment was estimated at 100<11>. The results of the inoculation, the speed of the whole body, the stability of the 24-hour period, the stability of the organs, and the stability of the organs. 2. Confirmation of the effectiveness of treatment for infectious diseases (1) Clinical isolation of Pseudomonas aeruginosa 8 strains, PS 96 points, 0.25% of the total, LB added to the culture at 37℃ for 24 hours, the bottom of the culture was formed. 3 strains of Pseudomonas aeruginosa were tested at 37℃, and the remaining strains were quantified. (2)The possibility that all Pseudomonas aeruginosa strains will be destroyed by the virus is shown.