電磁場による染色体障害作用をコメットアッセイにより直接検出するための研究

利用彗星试验直接检测电磁场引起的染色体损伤效应的研究

• 批准号: 16659153
• 负责人: 清水 英佑
• 金额: $ 1.73万
• 依托单位: Jikei University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16659153/
• 关键词: 電磁場; DNA損傷; コメットアッセイ; プレオマイシン; 脳神経細胞; アストロサイト; 染色体障害

本年度(〜平成18年3月31日)の研究実施計画研究方法:本年度は、電磁場と化学物質の複合曝露による脳神経細胞のDNA損傷を、動物に曝露して、コメットアッセイにて評価することとした。生後3日齢のSD系雄性ラットにDNA鎖切断薬である抗がん剤のbleomycin (BLM)を腹腔内投与し、50Hz・10mTの電磁場に24時間連続曝露した。全脳をホモジェナイザーにて細胞を単一にした後、0.5%低融点アガロースと混合した後に、スライドガラス上にその細胞を含むアガロースゲルを滴下した。ゲル固化後、4℃のlysis solutionに1時間浸漬した。水酸化ナトリウム溶液(pH13.8)に20分間浸漬し、DNAをunwindingした後、300mAの条件で水酸化ナトリウム溶液中(pH13.8)にて20分間電気泳動した。エチジウムブロマイドで染色し、蛍光顕微鏡で観察した。コメットアッセイ分析ソフトにて50個の細胞を画像解析し、DNA migrationを指標にDNA損傷を検討した。結果及び考察:電磁場単独曝露では、脳神経細胞にはDNA損傷は誘発されなかった。5mg/kg,10mg/kg BLM単独曝露ではDNA損傷は誘発された。また電磁場とBLMの複合曝露では、BLM単独曝露と比較して有意なDNA損傷の増加や減少などの変化は見られなかった。今回の検討では、電磁場と化学物質の複合曝露では、DNA損傷に変化は見られなかったが、今後は曝露時間・電磁場曝露強度・BLMの量などを変えて、電磁場とBLMとの複合曝露によりDNA損傷が増加するか、減少するかどうかを検討していく予定である。また他の培養細胞や動物を用いてコメットアッセイを行うことや、DNA損傷のメカニズムが解明されている化学物質(抗がん剤など)や脳腫瘍誘発物質を用いて、電磁場と化学物質の複合曝露によるDNA損傷の変化を併せて検討していく予定である。

This year on March 31, (~ pp.47-53 18) の research be applied project research methods: this year's は, electromagnetic field の と chemical compound exposure に よ る 脳 god 経 cell DNA damage の を, animal に exposure し て, コ メ ッ ト ア ッ セ イ に て review 価 す る こ と と し た. Three days after birth, 齢 <s:1> SD male ラットにDNA lock-cutting drug である antiが ん <s:1> bleomycin (BLM)を was intraperitoneally administered to <s:1>, 50Hz · 10mT <s:1> electromagnetic field に for 24 consecutive days 続 exposure た. All 脳 を ホ モ ジ ェ ナ イ ザ ー に て cells を 単 a に し た, 0.5% low melting point after ア ガ ロ ー ス と mixed し た に, after ス ラ イ ド ガ ラ ス on に そ を の cells contain む ア ガ ロ ー ス ゲ ル を drop し た. After ゲ ゲ curing, it is immersed in a 4 ° C <s:1> lysis solutionに for 1 time in <s:1> た. Water acidification ナ ト リ ウ (pH13.8) に ム solution impregnation し between 20 points, DNA を unwinding し た, 300 ma で の conditions after water acidification ナ ト リ ウ ム solution (pH13.8) に て 20 points between electric 気 swimming し た. Youdaoplaceholder0 ドで ドで ドで staining エチジウムブロ, 蛍 optical 顕 microscope で観 examination た た. コ メ ッ ト ア ッ セ イ analysis ソ フ ト に て 50 を portraits analytical し の cells, DNA migration を DNA damage index に を beg し 検 た. Results and び investigation: electromagnetic field 単 alone exposure で った, 脳 neural cell に <s:1> DNA damage <e:1> induced されな 脳 った. 5mg/kg,10mg/kg BLM単 alone exposed で 単 DNA damage induced by された. ま た と BLM の composite electromagnetic field exposure で は, comparison of BLM 単 alone exposure と し て intentionally な DNA damage の raised with や reduce な ど の variations change は see ら れ な か っ た. Today back の beg で 検 は, electromagnetic field の と chemical compound exposure で は, DNA damage に - turn は see ら れ な か っ た が, future は amount of exposure time, exposure intensity of electromagnetic field, BLM の な ど を - え て, electromagnetic field と BLM と の composite exposure に よ り DNA damage が raised plus す る か, reduce す る か ど う か を beg し 検 て い く designated で あ る. を ま た he の culture cell や animals with い て コ メ ッ ト ア ッ セ イ を line う こ と や, DNA damage の メ カ ニ ズ ム が interpret さ れ て い る chemicals (anti が ん tonic な ど) や 脳 swollen sores を 発 material with い て, electromagnetic field の と chemical compound exposure に よ る DNA damage の - を and せ て beg し 検 て い く designated で あ る.

项目成果

Fifty-hertz electromagnetic fields increase the frequencies of micronuclei induced by 5-fluorouracil in newborn rat astrocytes.

50 赫兹电磁场增加新生大鼠星形胶质细胞中 5-氟尿嘧啶诱导的微核频率。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Jikeikai medical journal 52・4
• 作者: Inoue;K. et al.;大神 明;Ono Y;Tomohiro Kitamura;Yuichi Miyakoshi 他
• 通讯作者: Yuichi Miyakoshi 他

アストロサイトを用いたコメットアッセイによる脳腫瘍誘発物質のDNA損傷の検出

使用星形胶质细胞彗星试验检测脑肿瘤诱导剂的 DNA 损伤

• 发表时间: 2004
• 期刊: 第33回日本環境変異原学会・第18回日本動物実験代替法学会合同学術大会講演要旨集(長崎)
• 作者: 劉丹;宮越雄一;清水英佑
• 通讯作者: 清水英佑

The frequencies of micronuclei induced by cisplatin in newborn rat astrocytes are increased by 50-Hz, 7.5-and 10-mT electromagnetic fields

• DOI: 10.1007/bf02900806
• 发表时间: 2005-05-01
• 期刊: Environmental Health and Preventive Medicine
• 影响因子: 4.7
• 作者: Miyakoshi, Yuichi;Yoshioka, Hayato;Shimizu, Hidesuke
• 通讯作者: Shimizu, Hidesuke