新規蛍光物質CdSeナノクリスタルによる食道癌細胞の生体内イメージング

(CdSeナノクリスタルの作成)CdSeナノクリスタルは、安定した作成法を確立したが、官能基を結合させるための外殻ポリマーコーティングが必要である。生体に無毒なシリカでコーティングを行ったところ、蛍光特性が減弱する現象が認められ、そのままでは本実験に使用できなかったため、種々の条件下で、改良したコーティング法を試行したが、その解決には至らなかった。(腫瘍の体外からのイメージング)Her2抗体を付加したCdSeナノクリスタルは坦癌マウス腫瘍特異的に集積し、体外からのイメージングができたが、高感度CCDカメラを組み込んだ装置と自家蛍光のsubtraction処理が必要である。800nmの蛍光で、約1cmの深部まで観察可能であった。(大動物によるセンチネルノードナビゲーション内視鏡下手術応用への基礎的実験)胸腔や腹腔など体腔内は皮膚の自家蛍光の影響が少なく、内視鏡下操作であれば基本的に暗い空間であるので蛍光波長を捉えるのに都合がよい。ブタを用いて大動物体内でCdSeナノクリスタルの蛍光検出を試みた。消化管内視鏡下に食道粘膜下層にCdSeを局注した場合の食道周囲リンパ節、反回神経周囲リンパ節を胸腔鏡で、胃粘膜下層に局注した場合の左胃動脈周囲リンパ節を腹腔鏡で観察した。このとき使用した体腔鏡は通常の手術用硬性内視鏡の先端にレーザー照射装置を組み込んだ自作のものを用い、ナノクリスタルは蛍光が長波長の800nmを用いた。リンパ節の蛍光が検出でき、少なくとも数十分観察が可能であることを確認した。センチネルナビゲーションに応用可能であり、官能基を付加したクリスタルであれば機能を持たせて、転移リンパ節だけに集積させることも可能となる。

(CdSeナノクリスタルの作成)CdSeナノクリスタルは、安定した作成法を確立したが、官能基を結合させるための外殻ポリマーコーティングが必要である。生体に無毒なシリカでコーティングを行ったところ、蛍光特性が減弱する現象が認められ、そのままでは本実験に使用できなかったため、種々の条件下で、改良したコーティング法を試行したが、その解決には至らなかった。(腫瘍の体外からのイメージング)Her2抗体を付加したCdSeナノクリスタルは坦癌マウス腫瘍特異的に集積し、体外からのイメージングができたが、高感度CCDカメラを組み込んだ装置と自家蛍光のsubtraction処理が必要である。800nmの蛍光で、約1cmの深部まで観察可能であった。(大動物によるセンチネルノードナビゲーション内視鏡下手術応用への基礎的実験)胸腔や腹腔など体腔内は皮膚の自家蛍光の影響が少なく、内視鏡下操作であれば基本的に暗い空間であるので蛍光波長を捉えるのに都合がよい。ブタを用いて大動物体内でCdSeナノクリスタルの蛍光検出を試みた。消化管内視鏡下に食道粘膜下層にCdSeを局注した場合の食道周囲リンパ節、反回神経周囲リンパ節を胸腔鏡で、胃粘膜下層に局注した場合の左胃動脈周囲リンパ節を腹腔鏡で観察した。このとき使用した体腔鏡は通常の手術用硬性内視鏡の先端にレーザー照射装置を組み込んだ自作のものを用い、ナノクリスタルは蛍光が長波長の800nmを用いた。リンパ節の蛍光が検出でき、少なくとも数十分観察が可能であることを確認した。センチネルナビゲーションに応用可能であり、官能基を付加したクリスタルであれば機能を持たせて、転移リンパ節だけに集積させることも可能となる。