大腸Stem cellsを用いたArtificial colon作成の基盤的研究

利用结肠干细胞构建人工结肠的基础研究

• 批准号: 16659356
• 负责人: 藤本 康二
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16659356/
• 关键词: Artificial colon; 人工腸管; 大腸stem cells; β1インテグリン; Organoid units; Polymer tubes

本研究の目的は、β1インテグリンが大腸stem cellsのマーカーであることを利用して分離したsingle stem cellsが、in vivoの環境において正常の構造をもったcolon (artificial colon)の再生につながるどうかを検討することである。われわれは、平成14年度に申請した萌芽研究「インテグリン発現に基づいた消化管Stem Cells同定・分離のための基盤的研究」にてβ1インテグリンが大腸stem cellsのマーカーであることを見出した(Fujimoto et al.,Gastroenterology 123(6):1941-1948,2002)。また最近、Vacantiらは機能性をもった人工腸管(Tissue-engineered intestine)の作成に関する興味深い報告をおこなった(Transplantation 67(2):227-233,1999)。彼らは、neonatal ratsのintestineからcrypt fragments (organoid units)を抽出し、このfragmentsをporous biodegradable polymer tubeに充填しadult ratsの大網内に移植した。40日後に移植されたorganoid unitsが正常のmucosaをもったintestineへと変化していることを観察した。今回の研究では、人工腸管(Tissue-engineered intestine)作成のために、Vacantiらが用いたneonatal ratsから抽出したcrypt fragments (organoid units)ではなく、われわれの方法(β1インテグリンによる大腸stem cellsの分離)によってadult ratsのcolonから分離したsingle stem cellsを用いてin vivoの環境において正常の腸管を形成しうるかどうかを検討することとした。現在までに、Lewis rats正常大腸上皮(crypts)におけるインテグリン発現を免疫染色にて検討し、ヒトと同様にβ1インテグリンがstem cellsが存在すると言われているcryptsの底部付近にのみ発現していることを確認した。さらに、現在、stem cellsに特異的なβ1インテグリン発現に基づいてadult Lewis rats正常大腸上皮からcrypt cellsを清潔操作にて分離し、蛍光免疫細胞染色により強発現細胞(stem cells)のみをsortingする安定した手技を確立中である。この方法が確立した後、sortingされた細胞をbiodegradable polymer tubesへseedingし、stem cells-polymer constructsを作成する予定である。

The purpose of this study is to separate single stem cells from large intestine stem cells and to investigate the regeneration of colon (artificial colon) in vivo environment. "Research on the identification and isolation of large intestine stem cells"(Fujimoto et al., Gastroenterology 123(6):1941-1948,2002)。Recently, Vacanti has been reported on the preparation of functional artificial intestine (Tissue-engineered intestine)(Transplantation 67(2):227- 233, 1999). The intestine of neonatal rats is extracted from crypt fragments (organoid units), and these fragments are filled into adult rats 'large net. 40 days later, the transplant of organoid units was carried out. In this paper, we study the method of extracting crypt fragments (organoid units) from neonatal rats by using artificial intestine (Tissue-engineered intestine). The presence of stem cells in Lewis rats normal colon epithelium (crypts) was confirmed by immunostaining. In addition, stem cells specific β1-cell sorting and development of basic cells in adult Lewis rats normal colon epithelium and crypt cells in cleaning operations were isolated, and stem cells in light immune cell staining and sorting were established. After the method is established, sorting and sorting of biodegradable polymer tubes and seeding of stem cells-polymer constructs are performed.

项目成果

Hepatic regeneration and enforced PDX-1 expression accelerate transdifferentiation in liver

• DOI: 10.1016/j.surg.2004.05.024
• 发表时间: 2004-08-01
• 期刊: SURGERY
• 影响因子: 3.8
• 作者: Koizumi, M;Doi, R;Imamura, M
• 通讯作者: Imamura, M

Conditional transformation of mouse pancreatic epithelial cells : An in vitro model for analysis of genetic events in pancreatocarcinogenesis.

小鼠胰腺上皮细胞的条件转化：用于分析胰腺癌发生中遗传事件的体外模型。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Biochem Biophys Res Commun 319(12)
• 作者: Koizumi;M.;Doi;R.
• 通讯作者: R.

臨床内科学入門

临床内科概论

• 发表时间: 2005
• 作者: Masahide Onoue;et al.;藤本 康二
• 通讯作者: 藤本 康二

Surgical resection deteriorates gemcitabine-induced leukopenia in pancreatic cancer.

手术切除会恶化吉西他滨引起的胰腺癌白细胞减少症。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Int.J.Clin.Oncol. 9
• 作者: Onoue;M.
• 通讯作者: M.

Chronic exposure of transforming growth factor beta 1 confers a more aggressive tumor phenotype through downregulation of p21 in conditionally immortalized pancreatic epithelial cells.

长期暴露于转化生长因子β1会通过条件永生化胰腺上皮细胞中p21的下调而赋予更具侵袭性的肿瘤表型。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Surgery 136
• 作者: Daisuke Ito;et al.
• 通讯作者: et al.