リガンド依存性・非依存性のエストロゲン受容体活性化と核内分布変化を可視化する試み
リガンド依存性・非依存性のエストロゲン受容体活性化と核内分布変化を可視化する試み
尝试可视化配体依赖性和独立的雌激素受体激活和核分布变化
批准号：
16659444
负责人：
倉智 博久
金额：
$2.05万
依托单位：
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2004
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
2004 至 2005
中文摘要
翻译
エストロゲン受容体(ER)は、エストロゲン(E2)と結合すると核内での分布が変化し、これはE2の作用発現(ERの活性化)に重要であると考えられている。一方、ERは上皮成長因子(EGF)やインスリン様増殖因子-1(IGF-1)でも活性化され、事実これらの増殖因子はエストロゲン様作用を発揮する。しかし、増殖因子によるERの核内分布の変化について検討した報告は世界的にもない。本年度も、昨年に続いて、乳癌細胞であるMCF-7細胞に、GFP-ERα(GFP-ER)またはERαのactivation function 2(AF2)領域を欠失したGFP-mutant ERα(GFP-mtER)をトランスフェクションした。共焦点レーザー顕微鏡でE2およびEGF、IGF-1によるGFP-ERおよびGFP-mtERの分布の変化を観察した。さらにEGFとIGF-1の細胞内シグナル伝達経路の阻害剤であるMEK inhibitor(PD98059)とPI3 kinase inhibitor(LY294002)前投与の影響も検討した。GFP-ERは核内に均一に存在し、E2投与後10分で核内分布が不均一な集積を呈した。EGF投与後30から60分でGFP-ERの分布がリガンド投与と同様に変化し、PD98059を前投与するとこの変化はおこらなかった。IGF-1投与でもERの分布は変化し、LY294002を前投与するとこの変化が観察されなかった。またGFP-mtERでは、E2およびEGF、IGF-1投与で核内分布の変化が観察されなかった。EGFやIGF-1によるERの核内分布の変化がはじめて確認された。さらに、この現象には、MAP kinaseとPI3 kinase-Akt系が関与し、AF2領域が必要であることが示唆された。
英文摘要
エストロゲン受容体(ER)は、エストロゲン(E2)と結合すると核内での分布が変化し、これはE2の作用発現(ERの活性化)に重要であると考えられている。一方、ERは上皮成長因子(EGF)やインスリン様増殖因子-1(IGF-1)でも活性化され、事実これらの増殖因子はエストロゲン様作用を発揮する。しかし、増殖因子によるERの核内分布の変化について検討した報告は世界的にもない。本年度も、昨年に続いて、乳癌細胞であるMCF-7細胞に、GFP-ERα(GFP-ER)またはERαのactivation function 2(AF2)領域を欠失したGFP-mutant ERα(GFP-mtER)をトランスフェクションした。共焦点レーザー顕微鏡でE2およびEGF、IGF-1によるGFP-ERおよびGFP-mtERの分布の変化を観察した。さらにEGFとIGF-1の細胞内シグナル伝達経路の阻害剤であるMEK inhibitor(PD98059)とPI3 kinase inhibitor(LY294002)前投与の影響も検討した。GFP-ERは核内に均一に存在し、E2投与後10分で核内分布が不均一な集積を呈した。EGF投与後30から60分でGFP-ERの分布がリガンド投与と同様に変化し、PD98059を前投与するとこの変化はおこらなかった。IGF-1投与でもERの分布は変化し、LY294002を前投与するとこの変化が観察されなかった。またGFP-mtERでは、E2およびEGF、IGF-1投与で核内分布の変化が観察されなかった。EGFやIGF-1によるERの核内分布の変化がはじめて確認された。さらに、この現象には、MAP kinaseとPI3 kinase-Akt系が関与し、AF2領域が必要であることが示唆された。
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Lowering intracellular and extracellular calcium contents prevents cytotoxic effect of ethylene glycol-based vitrification solution in unfertilized mouse oocytes.
降低细胞内和细胞外钙含量可防止乙二醇玻璃化溶液对未受精小鼠卵母细胞的细胞毒性作用。
降低细胞内和细胞外钙含量可防止乙二醇玻璃化溶液对未受精小鼠卵母细胞的细胞毒性作用。
DOI：
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发表时间：
2004
期刊：
Mol Reprod Dev 68
影响因子：
--
作者：
[Sakamoto T, Kondo K, Yamasoba T, Suzuki M, Sugasawa M, Kaga K, Takahashi T]
通讯作者：
Takahashi T
Both estrogen and raloxifene protect against β-amyloid-induced neurotoxicity in estrogen receptor α-transfected PC12 cells by activation of telomerase activity via Akt cascade.
雌激素和雷洛昔芬均可通过 Akt 级联激活端粒酶活性，从而防止雌激素受体 α 转染的 PC12 细胞中 β-淀粉样蛋白诱导的神经毒性。
雌激素和雷洛昔芬均可通过 Akt 级联激活端粒酶活性，从而防止雌激素受体 α 转染的 PC12 细胞中 β-淀粉样蛋白诱导的神经毒性。
DOI：
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发表时间：
2004
期刊：
J Endocrinol 183
影响因子：
--
作者：
[Sakamoto T, Kondo K, Yamasoba T, Suzuki M, Sugasawa M, Kaga K, Takahashi T, Du B]
通讯作者：
Du B
Medroxyprogesterone acetate attenuates estrogen-induced nitric oxide production in human umbilical cells.
醋酸甲羟孕酮可减弱人脐细胞中雌激素诱导的一氧化氮的产生。
醋酸甲羟孕酮可减弱人脐细胞中雌激素诱导的一氧化氮的产生。
DOI：
--
发表时间：
2004
期刊：
Biochem Biophys Res Commun 324
影响因子：
--
作者：
[Ashida S, Miki T, et al., Oishi A]
通讯作者：
Oishi A
Growth factors change nuclear distribution of estrogen receptor-α via mitogen-activated protein kinase or phosphatidylinositol 3-kinase cascade in a human breast cancer cell line.
生长因子通过丝裂原激活蛋白激酶或磷脂酰肌醇 3 激酶级联改变人乳腺癌细胞系中雌激素受体 α 的核分布。
生长因子通过丝裂原激活蛋白激酶或磷脂酰肌醇 3 激酶级联改变人乳腺癌细胞系中雌激素受体 α 的核分布。
DOI：
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发表时间：
2005
期刊：
Endocrinology 146(9)
影响因子：
--
作者：
[Takahashi T, Ohmichi M, Kawagoe J, Ohshima C, Doshida M, Ohta T, Saitoh M, Mori-Abe A, Du B, Igarashi H, Takahashi K, Kurachi H]
通讯作者：
Kurachi H
DOI：
10.1038/sj.onc.1207582
发表时间：
2004-06-03
期刊：
ONCOGENE
影响因子：
8
作者：
[Kimura, A, Ohmichi, M, Murata, Y]
通讯作者：
Murata, Y
卵巣癌の間葉系幹細胞の同定と機能解析―その分子標的治療に向けての基礎的研究
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批准号：21659379
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项目类别：Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
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资助金额：$1.92万
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财政年份：2009
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负责人：倉智 博久
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依托单位：
海外基金