レンチウイルスを用いたメトロンファクタ1遺伝子導入による腎移植慢性拒絶の治療効果

慢病毒转metronfactor 1基因治疗慢性肾移植排斥反应的疗效

• 批准号: 16659442
• 负责人: 東 治人
• 金额: $ 1.66万
• 依托单位: Osaka Medical College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16659442/
• 关键词: Metron factor 1; hepatocyte Growth Factor; Macrophage stimulating Factor; レンチウイルス; アポトーシス

これまでの実験から以下1-4のことを明らかにした。1、腎移植慢性拒絶反応"の発症には急性拒絶、手術時の腎阻血再灌流障害、長期的な免疫抑制剤の投与による薬剤性腎障害などによる"機能糸球体数の減少"が深く関わっており、細胞増殖因子であるhepatocyte Growth Factor (HGF)が、これらの障害を軽減させ、慢性拒絶反応の発症を防止する。しかしながら、長期的なHGF全身投与は、悪性腫瘍を誘発する危険性が示唆され、臨床応用には充分な注意が必要である。2、Metron factor 1(MF-1)はHGFとMacrophage stimulating Factor (MSP)をキメラ状態として作製されたsynthetic growth factorであり、HGF,およびMSPの持つ"アポトーシス抑制作用"をHGF、MSPそれぞれのfactorに比較して有意に強く認めるが、悪性腫瘍を誘発させる作用はほとんど認めない。3、長期的なHGF全身投与を避ける方法として、移植腎における局所的遺伝子導入が考えられるが、これまで腎組織における確立された遺伝子導入手法は未だ報告されていなかった。今回我々はアデノウイルス並みの導入効率と、ゲノムに入ることで半永久的な遺伝子発現が可能なレンチウイルスをベクターとして腎組織への遺伝子導入に成功した。4、レンチウイルスをベクターとしてMF-1遺伝子を移植腎組織に局所的に遺伝子導入することで、"移植腎内でのより強いアポトーシス抑制作用"と、"全身でのより少ない悪性腫瘍誘発作用"を同時にしかも長期的に発現させ、慢性拒絶反応の発症を防止し移植腎の長期生着を図ることを目的として、A),B)の実験をすすめている。A)MF-1-レンチウイルスの作成(組み換えDNA実験における機関内協議会承認済)既に調整済みで必要なvirusを順次作成(In vitroでの予備実験で効果が確認されている)B)MF-1-レンチウイルス移植腎導入の条件設定1)で作成したMF-1-Renti virusを種々の濃度で腎動脈から還流し、一定時間腎組織内で作用させた後、レシピエントに移植し、2、4、6、8日後におけるMF-1の腎組織内蛋白濃度および組織障害の程度をELISA、および組織学的手法を用いて検討した。

The following 1-4 points are the first to be recorded. 1. Chronic kidney transplant rejection syndrome includes acute rejection, renal obstruction reperfusion injury during surgery, long-term immunosuppressive drug administration, and "decreased number of functional spheres." For example, long-term systemic administration of HGF is necessary for the development of acute and chronic inflammatory lesions. 2. Metron factor 1(MF-1) has a negative effect on HGF and Macrophage stimulating Factor (MSP). 3. Methods of long-term systemic administration of HGF and prevention of kidney transplantation were studied. Methods of gene introduction into kidney transplantation were established. Now, we have successfully introduced the gene into the kidney tissue. 4. The MF-1 gene is introduced into the organ of kidney transplantation. The inhibition effect of MF-1 gene in kidney transplantation is strong. The induction effect of MF-1 gene in whole body is weak. The long-term development and prevention of chronic rejection syndrome are also important. A),B). A)MF-1-(Group DNA change) Internal agreement will recognize the virus) Both adjust the virus and create the necessary virus in sequence B)MF-1-Renti virus condition setting for kidney transplantation 1) MF-1-Renti virus seed concentration is established, renal artery flow is increased, renal tissue function is increased after a certain period of time, MF-1-Renti virus is transplanted, 2, 4, 6. After 8 days, MF-1 protein concentration in kidney tissue and the degree of tissue damage were investigated by ELISA, tissue and histological methods.

项目成果

Epithelial localization of green fluorescent protein-positive cells in epididymis of the GAD67-GFP knock-in mouse

• DOI: 10.2164/jandrol.04157
• 发表时间: 2005-09-01
• 期刊: JOURNAL OF ANDROLOGY
• 作者: Abe, H;Yanagawa, Y;Watanabe, M
• 通讯作者: Watanabe, M

Effect of Smad7 expression on metastasis of mouse mammary carcinoma JygMC(A) cells

• DOI: 10.1093/jnci/dji399
• 发表时间: 2005-12-07
• 期刊: JNCI-JOURNAL OF THE NATIONAL CANCER INSTITUTE
• 影响因子: 10.3
• 作者: Azuma, H;Ehata, S;Horie, S
• 通讯作者: Horie, S

Characterization of serum IgA in beta4GalT-I-deficient mice developing IgAN-like disease

发生 IgAN 样疾病的 beta4GalT-I 缺陷小鼠血清 IgA 的特征

• 发表时间: 2005
• 期刊: Nephrology Suppl 6
• 作者: Asano;M. et al.
• 通讯作者: M. et al.

Cellular localization of GABA and GABAB receptor subunit proteins during spermiogenesis in rat testis

• DOI: 10.2164/jandrol.04185
• 发表时间: 2005-07-01
• 期刊: JOURNAL OF ANDROLOGY
• 作者: Kanbara, K;Okamoto, K;Watanabe, M
• 通讯作者: Watanabe, M

Involvement of angiopoietins in cancer progression in association with cancer cell-- fibro blast interaction.

血管生成素参与癌症进展与癌细胞-成纤维细胞相互作用相关。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Anticancer Res. 25,1A
• 作者: Maruyama E;Sakamoto T;Azuma H;Ito Y;Katsuoka Y;Otsuki Y.
• 通讯作者: Otsuki Y.