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自己骨髄由来間葉系幹細胞にタンパク質導入法を応用した歯槽骨再生技術の開発

应用蛋白导入法自体骨髓间充质干细胞开发牙槽骨再生技术

基本信息

批准号：
16659534
负责人：
完山学
金额：
$ 2.05万
依托单位：
Okayama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は,タンパク質導入法を用いて,BMP,SHH,FGF,IGF,TGF-b,CTGFなど骨形成に関連する成長因子を自己骨髄由来間葉系幹細胞内に導入し,次にそれらをキャリアとともに抜歯窩や実験的な歯槽骨欠損部位に移植することで歯槽骨の再生を試みようとするものである。昨年度は,FITCとCTGF,そのファミリーであるcyr61,novなどの骨形成関連遺伝子のクローニングを行った。今年度はBMP-2,-4,SHH,FGF-2,galectin-1,-3,-9,sod-1など骨形成に関連する成長因子をコードするcDNAのクローニングを行った。現在,これらの遺伝子にPTD配列を含んだ遺伝子を増幅しPETベクターにクローニングを行っている。in vivo実験においては,昨年度行った抜歯窩モデルが実験群とコントロール群で差が認められなかったことから今年度は大きな骨欠損モデルで試みた。はじめに生後8週齢のWistar系雄性ラット頭蓋骨全層骨欠損モデル(critical size defect)を作製した。これはラット頭蓋骨に直径6mmの全層骨欠損を作成したもので,この欠損部にBMP-2,FGF-2を含浸させた直径6mmのゼラチンハイドロゲルシート,I型コラーゲンシートを移植したところ,術後4週でゼラチンハイドロゲルシートもしくはI型コラーゲンシートとBMP-2を用いたものは,BMP-2単体やbFGF単体と比較して著名な骨再生が認められた。しかし,再生部位を歯槽骨に近づけるべく3.0kg雄性日本白色ウサギ下顎骨骨欠損モデル(defect size : 6mm)を用いた場合,I型コラーゲンキャリアとbFGFを用いても術後4週でコントロールとの著名な差を見いだすことができなかった。今後は,PTD配列を含んだ骨形成関連遺伝子とゼラチンハイドロゲルやI型コラーゲンキャリア,さらに骨髄由来間葉系幹細胞を組み合わせた実験系を構築する予定である。

In this study,BMP,SHH,FGF,IGF,TGF-b,CTGF and other growth factors related to bone formation were introduced into mesenchymal stem cells from bone marrow, followed by transplantation of bone marrow and alveolar bone defects. Last year,FITC and CTGF, the company's first batch of cyr61,nov, bone formation related gene, and the company's first batch of cyr61,nov. This year, BMP-2,-4, SHH,FGF-2,galectin-1,-3,-9, sod-1, growth factors associated with bone formation, and cDNA sequences were identified. Now, the PTD configuration of this file includes the increase of the number of files in the file. In vivo, we have a lot of problems. We have a lot of problems. 8 weeks after birth, the Wistar male was subjected to a full-thickness skull defect (critical size defect) The bone defect of 6mm in diameter in the cranium was created. The defect was immersed in BMP-2 and FGF-2. The bone defect of 6mm in diameter was transplanted. Four weeks after operation,BMP-2 and bFGF were used. In case of mandibular defect (defect size : 6mm), type I collagen can be removed and bFGF can be used. In the future,PTD alignment will include the construction of bone formation related genes, bone formation related genes, and bone formation related stem cells.