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シアノバクテリアの概日振動系の大腸菌での再構成

大肠杆菌蓝藻昼夜节律振荡系统的重建

基本信息

批准号：
17657002
负责人：
岩崎秀雄
金额：
$ 2.24万
依托单位：
Waseda University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17657002/
关键词：
シアノバクテリア大腸菌再構成概日リズム KaiC リン酸化

项目摘要

私たちは,シアノバクテリアでは概日リズム発生の主要因が転写翻訳フィードバックではないことを最近明らかにした(Tomtia et al.2005)。さらに,in vitroではKaiA, KaiB, KaiCの三者でKaiCのリン酸化振動に十分であることを示した(Nakajima et al.2005)。本研究では,このリン酸化振動を大腸菌に移植できるかどうかを試み,さらに人工的な入出力系を付与出来るかどうかを試すことが主要目的である。いまのところ,誘導性プロモーターの下流にkai遺伝子群を組み込み,大腸菌株に導入したが,まだリン酸化振動の再構成には成功していない。しかしながら,出力系のデザインのため,KaiC結合ヒスチジンキナーゼSasAのパートナーとなる応答因子の探索を行い,有力な候補SyelRR16を得た。sasA同様,syelRR16欠失株においても転写リズムは著しく減衰した。興味深いことに,SasAの自己リン酸化ならびにSyelRR16へのリン酸基転移反応は,KaiCのリン酸化リズムの程度に応じて顕著に変化することが明らかになった。SyelRR16は典型的なOmpR型DNA結合蛋白質であることから,KaiABC蛋白質による翻訳後修飾レベルの基本振動が,SasA->SyelRR16のリン酸化リレーと介して転写調節に変換されることが強く示唆された。このシステムを用いれば,Kai振動をSasA->SyelRR16を介して下流遺伝子発現に変換し,自由に振動系を調節出来る可能性がある。

The main cause of the emergence of the disease is the recent development of the disease (Tomtia et al.2005). KaiA, KaiB, KaiC are three of the three elements in the vitro. The main purpose of this study is to test the transplantation of Escherichia coli by acidification vibration, and to test the artificial input force system. In the middle of the day, the induction of bacteria in the lower reaches of the kai gene sub-group was successfully completed, and the Escherichia coli strain was successfully introduced. KaiC combined with sasA,syelRR16, is missing. In addition,SasA's own acidification and SyelRR16's acid radical shift reaction,KaiC's own acidification and degree of transformation are also discussed. SyelRR 16 is a typical OmpR-type DNA binding protein. It is a post-translational modification of the KaiABC protein. In this case,Kai vibration SasA->SyelRR16 is the only way to change the occurrence of downstream particles, and the possibility of adjusting the free vibration system is very high.