細胞外分泌性因子の免疫的機能撹乱による維管束形成機構の解析

细胞外因素免疫功能紊乱导致血管束形成机制分析

• 批准号: 17657014
• 负责人: 篠原 直貴
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17657014/
• 关键词: モノクローナル抗体; 細胞外分泌性因子; 機能攪乱; 維管束分化; オーキシン; 数理モデル

平成17年度は、2つのアプローチ法で「抗体により維管束分化における抗原分子の機能を探る」という方法論の確立を図った。1つめは、植物抗原を認識するモノクローナル抗体を植物体で発現させて、植物体の表現系を確認することで抗原の機能を探るというもので、この目的のため、植物抗原を認識するモノクローナル抗体8種類および部位特異的に変異を導入して結合活性を落とした変異型モノクローナル抗体2種類を植物体に導入した。すべての抗体種で2つ以上の安定した形質転換体を得ることを目指したが、予想以上にこの行程に時間がかかり、3種の抗体についてのみ安定して抗体を発現する2ライン以上の形質転換体が得られている。同時に、この行程での効率の悪さを回避するために、抗体発現をチェックする簡便な方法を開発した。表現系については、示唆的ながら、老化が早まるなどの表現系を示す個体が含まれているようだ。もう1つのアプローチとして、抗体を、維管束分化誘導系培養細胞に添加し、抗原の機能を阻害できないか探ることにした。この実験の過程で、培地の中性化に伴う分化阻害が問題となったので、阻害効果の回復条件を探ったところ、オーキシンの過剰投与が回復に十分であることを見出した。この発見を機に、維管束分化を引き起こすオーキシン作用について、詳しく調べオーキシンの取り込み、代謝、受容と関連づけて維管束分化予測できる数理モデルを構築し、その予測が実測した結果と良く対応することを見出した。また、抗体の培養細胞への添加実験のため、抗体を5種類ほど大量に精製した。

In 2017, the establishment of the methodology of "Exploring the function of antigen molecules in vascular bundle differentiation by antibody" was carried out. 1. Plant antigen recognition, identification of plant expression system, detection of antigen function, identification of plant antigen recognition, introduction of 8 types of antibodies and site-specific differences, binding activity, and introduction of 2 types of antibodies into plants. More than 2 types of stable and qualitative antibodies were detected, and more than 2 types of stable and qualitative antibodies were detected. At the same time, a simple method for avoiding the occurrence of antibodies was developed. The expression system is composed of two parts: one part is the expression system, the other part is the expression system, and the other part is the expression system. 1. Antibodies, vascular bundle differentiation inducers, cell culture, antigen function inhibition The process of neutralization, differentiation, resistance, recovery conditions of resistance, over-investment and recovery are discussed The development mechanism, vascular bundle differentiation mechanism, vascular bundle differentiation mechanism, vascular 5 kinds of antibodies are added to cultured cells and purified in large quantities.

项目成果

Higher extracellular pH suppresses tracheary element differentiation by affecting auxin uptake.

较高的细胞外 pH 值通过影响生长素的摄取来抑制气管元件的分化。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Planta 223(in press)
• 作者: Tomita K;Ishitani R;Fukai S;Nureki O;富田 耕造;Munetaka Sugiyama;Mineko Konishi;Akitoshi Iwamoto;Yasushi Sato;Naoki Shinohara
• 通讯作者: Naoki Shinohara