权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

ダイズの高α-トコフェロール化遺伝子の同定と作用機序の解明

大豆高α-生育酚化基因的鉴定及其作用机制的阐明

基本信息

批准号：
17658001
负责人：
喜多村啓介
金额：
$ 2.24万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17658001/
关键词：
ダイズ α-トコフェロール遺伝子作用機序 γ-TMT

项目摘要

高α-トコフェロール(Toc)品種「Keszthelyi A.S.」と普通品種「いちひめ」の交配後代の分離集団を用いた解析の結果、Sat_243とSat_167(連鎖群K)の遺伝子型とα-Toc含有率との問に密接な関係を認めた。また、α-Toc含有率とγ-Toc含有率の間に高い負の相関を認め,高α-Toc形質にはγ-Tocをα-Tocに変換するγ-Tocopherol methyltransferase(γ-TMT)が関与することが示唆された。次に,トコフェロール生合成関連酵素、Homogentisate phytyltransferase(HPT),2-Methyl-6-phytyl-1,4-benzoquinol methyltransferase(MPBQMT),Tocopherol cyclase(TC),及びγ-TMTの4種の酵素遺伝子について,ダイズTACライブラリーからPCRにより上記4酵素遺伝子を含むと推定されるクローンを単離した。さらに、上記の中でも特に高α-Toc化に強く影響を及ぼすと考えられるγ-TMTについて解析を進め,cDNAを用いた3'-RACEの結果から、γ-TMT遺伝子には少なくとも3コピー(γ-TMT1,γ-TMT2,γ-TMT3)が存在することを明らかにした。また、これらの3つの遺伝子の発現解析を行うためにリアルタイムRT-PCRを試みた。しかしながら、これら3つの遺伝子のC末端領域の配列は非常に類似性が高く、個々の遺伝子を識別するための特異的プライマーを設計することはできなかった。そこで、発現解析にはこれら3つの遺伝子を全て検出できる相同領域においてプライマーを設計して行った。なお、γ-TMT遺伝子の発現の程度は、内在性のα-チューブリン遺伝子の発現と比較して評価を行った。高α-Toc品種と普通品種それぞれにおいて、開花後30日、40日および50日後の種子から全RNAを抽出しステージごとのγ-TMT遺伝子の発現を定量した。その結果、高α-Tocは普通品種とくらべ、開花後40日から50日にかけてγ-TMT遺伝子発現の極端な増加が認められた。このことから、高α-Toc品種では登熟中後期にγ-TMT遺伝子の発現が極端に増加することで種子におけるα-Toc含量を増加させることが示唆された。これまでに、連鎖群Kに寄与率の大きな1個のOTL座を認めており、現在、γ-TMT1,γ-TMT2,γ-TMT3の多型を調査し、いずれの遺伝子座が本OTL座と一致するか解析を進めている。

High-alpha-Toothed (Toc) variety "Keszthelyi A.S." and the common variety "いちひめ", the result of the separation of the offspring of the mating and the analysis by いた, Sat_24 3とSat_167 (linkage group K) has a latent subtype and α-Toc content rate, and the close relationship between them has been determined.また,α-Toc content rate and γ-Toc content rate, high and negative correlation, high α-Toc quality, γ-Toc, α-Toc, γ-Tocopherol Methyltransferase(γ-TMT) is related to methyltransferase(γ-TMT). Tocopherol, Homogentisate phytyltransferase (HPT), 2-Methyl-6-phytyl-1,4-benzoquinol methyltransferase (MPBQMT), Tocopherol cyclase(TC), and びγ-TMTの4 kinds of enzymes, について, ダイズTACライブラリーからPCRにより⁴ 4 enzyme legacy 伝子をcontains むと presumed to be されるクローンを単した.さらに、上记の中でも特に高α-Toc化に强く Impact を和ぼすと考えられるγ-TMTについてanalyticsを入め,cDNAを用いた3'-RAC EのRESULTS から、γ-TMT 缝子には小なくとも3コピー(γ-TMT1, γ-TMT2, γ-TMT3) することを明らかにした.また、これらの3つの缝子の発新analytic を行うためにリアルタイムRT-PCRをtestみた.しかしながら、これら3つの伝子のC-terminal field のalignment はvery にsimilarity が高く、々の缝子をidentificationするためのspecific プライマーをdesignすることはできなかった.そこで、発现analysesにはこれら3つの伝子を全て検出できる Same field においてプライマーをDesignして行った.なお, γ-TMT 缝子の発appears in the degree of は, intrinsic のα-チューブリン缝子の発appears in comparison して Comment価を行った. High α-Toc varieties and ordinary varieties, それぞれにおいて, 30 days after flowering, 40 days after flowering, 50 days after flowering After the seeds are extracted, the whole RNA is extracted and the γ-TMT remains is quantified.そのfruit, high α-Toc は ordinary variety とくらべ, 40 days after flowering から 50 days にかけてγ-TMT 缝子発 appear の Extreme な Increase plus がcognize められた.このことから, high α-Toc varieties, medium and late ripening, γ-TMT 缝子の発成が极The content of α-Toc in the seeds of the end is increased and the content of the seeds is increased.これまでに, chain group Kに淳の大きな1 のOTL seat を知めており, now, γ-TMT1, γ-TM T2, γ-TMT3 multi-type investigation, analysis and analysis of OTL.